同源全血与血浆或血清标本抗体检测结果的总符合率为99%,显示两者具有高度一致性。本研究提示,胶体金法检测SARS-CoV-2抗体有较好的敏感性及特异性,可用于临床辅助诊断和流行病学调查等,具有较广泛的应用场景,在新冠肺炎疫情防控中具有一定的应用价值。
利用PCR技术扩增西尼罗病毒(WNV)E蛋白基因并将其插入原核表达载体pET-30a(+),构建重组质粒pET-30aA-1210477(+)-WNV-E,并转化至大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中,经IPTG诱导目的蛋白表达,对诱导条件进行优化,利用His镍柱亲和层析法纯化目的蛋白,纯化后的蛋白经SDS-PAGE与Westernblot鉴定正确后,免疫BALB/c小鼠制备多克隆抗体并进行间接免疫荧光鉴定。结果显示 WNV E蛋白在大肠杆菌中以包涵体形式被成功表达,蛋白最佳诱导条件为3已经7℃,0.8 mmol/L IPTG诱导5 h,经间接免疫荧光鉴定多克隆抗体能特异性识别WNV E蛋白。本研究成功表达并纯化了WNV E蛋白,证明该蛋白具有良好的免疫原性,为WNV抗原、抗体检测方法的建立和新型疫苗的研发及相关研究奠定了基础。
目的 观察牙周炎基因疫苗pVAX1-HA2、pVAX1-HA2/IL-15经鼻黏膜免疫SD大鼠后的免疫和原性及其目的蛋白在免疫部位的表达。方法 32只SD大鼠分别经pVAX1-HA2、pVAX1-HA2/IL-15、pVAX1(空载体对照)和生理盐水(阴性对照)经鼻腔黏膜免疫(n=8)。ELISA法测定唾液SIgA抗体水平、免疫组织化学检测目的蛋白的表达情况以及进行动物的一般安全性检测。结果 ①牙周炎疫苗经鼻黏膜免疫后可以诱导机体产生唾液SIgA抗体,且抗体水平在实验组明显高于空载组和阴性对照组(P<0.05)。②目的蛋白在鼻腔黏膜表达。