因此,它被认为是一种潜在的具治疗作用的抗癌药物。然而,最近的研究显示,许多恶性肿瘤对TRAIL具有耐药性,这将成为该药物临床应用的瓶颈。雷公藤甲素(Triptolide,TPL)是从雷公藤中分离得到的一种独特的二萜结构形式。TPL在体内和体外均具有良好的抗肿瘤活性。我们前期的研究表明,低浓度TRAIL和TPL联合治疗胰腺癌细胞,通过增加胰PFTα鍗婃姂鍒舵祿搴PFTα浠锋牸腺癌细胞凋亡率,导致细胞死亡。但是,现有的研究对完全理解TPL在胰腺癌中致敏TRAIL的机制还远远不够。目的寻找TPL调控的TRAIL信号通路上游成分,进一步了解TPL提高TRAIL敏感性的调控机制。同时,进一步了解胰腺癌细胞发生发展过程中的重要分子机制。研究方法采用CCK-8、Celigo贴壁细胞计数系统检测细LGK-974订单胞增殖水平;采用免疫印迹法(Western blot)检测细胞的蛋白表达水平;采用免疫组化法(IHC)检测组织中蛋白的表达水平;采用免疫共沉淀法(Co-IP)检测蛋白的相互结合;采用投射电镜观察自噬小体;采用Transwell检测细胞迁移、侵袭水平;采用流式细胞仪(Flowcytometry)检测细胞凋亡;裸鼠皮JIB-04花费下成瘤检测肿瘤细胞体内生长能力;裸鼠肺转移实验检测肿瘤的体内侵袭转移能力。研究内容和结果本研究分为两个部分第一部分雷公藤甲素(Triptolide,TPL)通过抑制PUM1的表达水平增加胰腺癌细胞对TRAIL的敏感性的机制研究1.PUM1是胰腺癌细胞中TPL增强TRAIL敏感性的关键因子。基因芯片分析TPL、TRAIL、TPL+TRAIL(T+T)分别处理MIA PaCa-2细胞株的mRNA。