目的:检测具有EGFR突变临床特征的非小细胞肺癌患者EML4-ALK融合基因的发生率,分析其与临床特征的关系,为今后的非小细胞肺癌个体化治疗提供参考。 材料和方法: 1、在广西医科大学附属肿瘤医院标本库中共筛选出102例自2006年1月至2011年8月期间接受手术切除的新鲜非小细胞肺癌组织标本;入组的非小细胞许多肺癌患者均为中国人,且至少满足以下一个入组条件:女性、不吸烟/少吸烟和腺癌。 2、通过参考文献,本研究选用3对不同的引物对EML4-ALK融合基因进行PCR扩增。首先采用RNA提取试剂盒对102例新鲜肿瘤组织标本进行总RNA的提取,后采用逆转录试剂盒将其逆转录成cDNA,再用单管多重逆转http://www.selleckchem.cn/products/LBH-589.html录聚合酶链反应(Multi plex RT-PCR)对cDNA进行扩增。最后将PCR产物进行琼脂糖凝胶电泳,检测EML4-ALK融合基因的突变情况,并对在电泳中出现阳性条带的PCR产物进行直接测序,后将所测序列与EML4-ALK融合基因各亚型的已知序列进行比对,最终确定有无EML4-ALwww.selleckchem.cn/products/ink128.htmlK融合基因的突变及突变类型。 3、采用DNA提取试剂盒对EML4-ALK阳性标本进行DNA提取,后采用聚合酶链反应(PCR)对DNA进行扩增,再对PCR产物进行直接测序,以检测其EGFR(18-21号外显子)及KRAS(1、2号外显子)的突变情况。 4、从年龄、性别、吸烟史、病理类型、临床分期这五个临床特征上对EML4-ALK阳性和阴性的非小细胞肺癌患者进行对比。