01),细胞内ROS水平显著增强(P<0.01),T-SOD活性、GSH含量明显降低(P<0.05或P<0.01);与模型组比较,用依达拉奉和天麻酚性成分C预处理24h,细胞存活率明显升高(P<0.01),细胞内ROS水平下降(P<0.01),T-SOD活性和GSH含量明显升高(P<0.01)。2、与正常组比较,模型组Caspase-3活化程度显著增强(P<0.01),MMP升高,Caspase-9和Caspase-3蛋白表达增加(P<0.05或P<0.01);与模型组比较,依达拉奉可降低Caspase-3活化程度(P<0.01),提高MMP,对Caspase-9和Caspase-3的表达均有抑制作用(P<0.05);天麻酚性成分C各给药组均能够抑制细胞内Caspase-3活化和Caspase-9、Caspase-3表达(P<0.05或P<0.01);与正常组比较,模型组P-JNK、P-p38蛋白表达增加(P<0.01);天麻酚性成分C能够抑制P-JNK蛋白表达(P<0.01或P
糖皮质激素(Glucocorticoid,
还有 GC)是由肾上腺皮质合成和分泌的应激激素,其浓度受下丘脑-垂体-肾上腺(Hypothalamic-pituitary-adrenocortical axis, HPA轴)轴的调控。正常生理状态下,糖皮质激素对维持机体神经系统的正常生长发育以及生理和应激状态下内环境的稳定都极为重要。糖皮质激素作为很强的免疫抑制剂参与体内多种代谢过程,调控中枢神经系统的功能。研究证实,应激反应时肾上腺糖皮质激素过度分泌与生殖内分泌疾病密切相关,糖皮质激素能在下丘脑水平扰乱GnRH神经元的正常生理活动,从而抑制其生殖内分泌功能。GC能够通过糖皮质激素受体(Glucocorticoid receptor, GR)介导直接作用于促性腺激素释放激素(Gonadotropin-releasing hormone, GnRH)神经元,从而影响GnRH神经元的正常生理活动。下丘脑GnRH神经元上存在GR,同时,应激状态下的糖皮质激素对星形胶质细胞会产生一定影响。星形胶质细胞是神经系统胶质细胞的主要组成部分,近年来的研究发现,星形胶质细胞除了参与中枢神经系统的损伤和神经退行性疾病以及具有巨噬细胞的功能以外,在调控生殖方面也具有重要作用。研究表明,下丘脑星形胶质细胞能够分泌前列腺素E2 购买IKK抑制剂 VII (Prostaglandin E2, PGE2)、转化生长因子β(Transforming growth factor-alpha,
TGFβ)等活性因子,与GnRH神经元上相应的受体结合,促进GnRH的合成和分泌,控制生殖活动。另外,下丘脑星形胶质细胞还能通过黏合分子和GnRH神经元结合,完成信号转导,促使GnRH神经元分泌GnRH,从而调控生殖活动。但是星形胶质细胞能否直接分泌GnRH来控制生殖活动,还未见报道。本实验采用体外培养的大鼠下丘脑星形胶质细胞,探究糖皮质激素对星形胶质细胞分泌GnRH的调控机制。因此,需要获得较纯的下丘脑星形胶质细胞。实验采用重庆市中药研究所提供的1-3日龄的SD新生大鼠,经过原代细胞的分离培养,在经过多次纯化和传代培养获得纯化率达99%以上的星形胶质细胞。经过以上方法所得的星形胶质细胞可为体外研究提供符合要求的细胞。本实验采用体外培养的符合要求的星形胶质细胞,通过免疫荧光,荧光定量PCR, GnRH ELISA试剂盒检验星形胶质细胞是否分泌GnRH,结果显示星形胶质细胞能够分泌GnRH。为了检验GC对星形胶质细胞(Astrocyte, AST)表达GnRH的影响,本实验通过采用10-6mol/L,10-7mol/L,10-8mol/L的GC刺激培养的AST,分别检测10min、20min、30min、40min时AST
DNA Methyltransferase 抑制剂 GnRH水平,选出最佳时间和浓度。结果发现用10-8mol/L的GC刺激培养的AST,在30min时GnRH的表达量与对照组相比显著升高(P
哺乳类动物Caveolin家族是一组具有21-25KD大小的跨膜蛋白,包括caveolin-1,2,3三个成员。其中,cav2目前尚未发现有生理功能,而Cav1和Cav3则可通过抑制细胞内某些酶活性调控很多信号转导通路,参与细胞正常生理功能。近几年的研究显示,在多种组织细胞中都有Cav-1表达,很有可能作为一种肿瘤转移抑制因子,在肿瘤发生发展的病理过程中也扮演着一定角色。例如,研究显示,Cav1表达下调是加剧Lewis肺癌细胞恶性程度、
目的:探讨TGF-β1诱导皮肤成纤维细胞向肌成纤维细胞转分化的可能途径和调控机制。方法:将小鼠皮肤成纤维细胞(野生型和Smad3Knockout型)分为9组:野生型FB组、野生型FB+TGF-β1组、野生型FB+SB431542组、野生型FB+SB431542+TGF-β1组、Smad3KOFB组、Smad3KOFB+TGF-β1组、野生型FB+SB203580+TGF-β1组、野生型FB+PD98059+TGF-β1组和野生型FB+SP600125+TGF-β1组。各组细胞经同步化处理后,直接以TGF-β1刺激或经上述各激酶抑制剂预处理后再以TGF-β1刺激。收集细胞,一部分以单细胞RT-P…
目的:观察福尔马林致口颌面部炎性疼痛大鼠的三叉神经脊束核Vc核中P2X4-p38MAPK通路的变化及p38特异性抑制剂SB203580的镇痛疗效,探讨P2X4-p38MAPK通路在口颌面部炎性疼痛中的作用。方法:选择体重200~250 g健康SD大鼠,在左上唇皮下注射2.