05),血小板有增高趋势。3、BALF中有核细胞计数和分类结果显示照射组与TGF-β3组BALF中细胞总数和中性粒细胞数有增高的趋势,但统计学无显著差异。液体悬浮芯片细胞因子检测结果显示照射后小鼠BALF中趋化因子有先增高后降低的趋势。而TGF-β3组促炎因子IL-12分泌增多、抑炎因子IL-4分泌减少。照射组的促炎因子IL-17随着照后时间延长有增加的趋势,其中在照后6个月显著高于对照组(P<0.05),而TGF-β3组的IL-17变化情况跟照射组正好相反,在照后1个月时显著增加(P<0.05),随后降低并恢复至正常水平。生长因子中,照射组和TGF-β3组的FGF-basic在照后出现了先增高再降低最后恢复的波动情况。照射组的VEGF在照后有增高的趋势,其中在照后1个月和照后6个月时与对照组相比显著增加(P<0.05)。4、照射能够引起照射组小鼠出现肺泡壁增厚、肺泡间隔明显增宽、成纤维细胞大量增生、肺泡结构严重破坏、胶原纤维大量沉积的典型纤维化病理改变。给予TGF-β3组小鼠病理变化比照射组出现的晚且程度较轻,同时胶原沉积减少,但仍然可见炎性淋巴细胞浸润,蛋白样液体渗出,局部肺泡萎陷,部分肺泡腔融合扩大,局部肺泡间隔增宽,以及部分绿染的胶原纤维。5、免疫组化结果显示照射后小鼠肺内MMP-9、TIMP-1表达与对照组相比均明显增加,其中MMP-9随照后时间的延长增加的更为显著,TGF-β3组MMP-9表达显著高于照射组(P<0.05)。TIMP-1随照后时间延长变化趋势不明显。6、照射组小鼠从照后1个月起肺内循环纤维细胞明显增加(P<0.05),随照后时间的延长,出现降低,但仍高于对照组(P<0.05)。照后1个月时,TGF-β3组循环纤维细胞数明显低于照射组(P<0.05),与对照组相比仍有增高(P<0.05);3m时与照射组水平接近;而6个月时低于照射组,恢复至对照组水平。7、照射组和TGF-β3组外周血Treg细胞比例随着照后时间的延长有降低趋势,但与对照组相比无明显差异。照射组肺内Th17细胞比例均显著高于对照组(P<0.05),而且随着照后时间延长而增高。而TGF-β3组变化规律和照射组相反,Th17细胞比例随着照后时间延长而降低,在照后1个月达到高峰,且显著高于照射组(P<0.05),到了照后6个月时,虽然仍然显著高于对照组(P<0.05),但已经显著低于照射组(P<0.05)。照射组肺内Treg细胞比例均显著高于对照组(P<0.05),而且随着照后时间延长而降低。而TGF-β3组Treg细胞比例随着照后时间延长而波动,其中在照后3个月达到高峰,且显著高于照射组(P<0.05),到了照后6个月时,与对照组相比已经无明显差异并且显著低于照射组(P
严重烧伤早期即可发生全身性炎症反应,而TGF-β_1/Smads信号通路与炎症调控密切相关。基于上述背景,本研究探讨了TGF-β_1/Smads信号通路在严重烧伤早期炎症反应中的作用。在30%TBSAⅢ°大鼠烧伤模型中发现以特异性阻滞剂SB431542抑制TGF-β_1/Smads信号通路的转导活性,显著降低了烧伤后促炎细胞因子TNFα、IL-1β、IL-6和细胞粘附分子E-Selectin、ICAM-1、CD11b的表达。严重烧伤后Smads的转导活性在4h～8h受到抑制,加用SB431542强化了这种抑制。抑制Smads活化可以减轻严重烧伤后肺脏损伤、降低肺组织含水量和血管通透性。实验表明TGF-β_1/Smads信号通路参与严重烧伤早期的炎症调控,烧伤后TGF-β√Smads信号通路的短暂抑制可能出自机体的自我保护机制。
TGF-β具有调节细胞周期的作用,对多种细胞具有生长抑制作用。本研究从角质细胞入手,采用TGF-β转导分子Smad4条件基因敲除小鼠,并在活体体和组织块培养条件下应用TGF-β受体抑制剂SB431542,应用免疫组织化学等方法,证实阻断TGF-β通路可以加速小鼠烧伤和切割伤的愈合。应用细胞培养技术,采用XTT法和流式细胞仪分析法,证实了在离体培养条件下,TGF-β1对小鼠角质细胞生长的抑制作用影响,和其受体抑制剂SB431542对其作用的去除作用。
目的:研究基质金属蛋白酶(MMP)在急性胰腺炎(AP)肺损伤(APALI)与炎症后组织重建中的作用及机制。方法:应用雨蛙素、L-精氨酸制备大鼠急性水肿型胰腺炎(AEP)模型和急性坏死型胰腺炎(ANP)模型,应用免疫组化、明胶电泳及Western

CB-839化学结构 以及 PR-171浓度 blot等技术,研究MMP在APALI和组织重建中的变化及可能机制。结果及结论:MMP-9在鼠和人APALI时胰腺和肺脏组织中的表达为阳性,且鼠ANP组强于AEP组,提示MMP-9在APALI的发病中可能起着重要作用。MMP抑制剂可以减轻AP时胰腺及远处靶器官的损害,为临床治疗APALI提供了可能的治疗思路。TGFβ1、P-smad3、MMP-2在AP炎症后胰腺组织中表达明显增强,且鼠ANP组比AEP组的表达强且持久,提示TGFβ-smad3通路、MMP-2在AP炎症后胰腺组织修复重塑中起着重要作用,且TGFβ可能上调MMP-2的表达,对这一通路进行干预可能有助于减轻胰腺ECM的过度沉积和促进ANP胰腺组织重建,降低急性炎症慢性化的可能。
各种癌症、重要脏器的纤维化病变等疾病是人类的主要死因和医药资源的主要主要消耗者。最新的研究表明,TGFβ信号的异常与这些疾病高度相关,而TGFβ信号通路中的重要节点TypeⅠ受体(ALK5)是治疗这些疾病的理想靶标。 本论文基于ALK5激酶功能区的晶体结构,参照p38-MAPK与SB203580复合物的结构特点,将已知的阳性化合物SB-431542与ALK5激酶功能区对接,得到SB-431542/ALK5复合物的模型。在分析两者结合模式的基础上,设计合成了1,3,5-三取代吡唑,1,2,4-三芳基咪唑,1,3,4-三芳基吡唑啉-5-酮和1,3,5-三取代吡唑啉等4大类共84个化合物。经~1H-NMR、NOE和MS,IR等光谱鉴定,辅以必要的化学法结构验证,确证了它们的化学结构。所有化合物都是未见于文献报道。 本实验室利用化合物对TGFβ诱导的荧光素酶报告基因表达的影响测定了所合成的目标化合物对ALK5激酶的抑制活性。试验结果显示大部分送筛化合物均有一定的ALK5激酶的抑制活性。从中发现高活性化合物1个(LXZ804),ALK5抑制率69%(1uM),与SB-431542接近,中等活性化合物9个(抑制率>30%,1uM)。用人胚胎肺细胞MTT法对部分活性化合物进行了毒性试验,结果显示,在30μM剂量下,大部分活性化合物的毒性小于阳性化合物。 依据我们对接得到的SB-431542/ALK5复合物结构和对试验结果所作的分析,结合文献报道的晶体结构信息,进行了初步的SAR分析,并勾勒出了较完善的SB431542与ALK5结合模式,以指导我们关于下一步的ALK5抑制剂的设计与合成工作。
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