1、1.0、10.0及100.0 nmol/L,干预时间均为6 h)和不同时间(空白对照组加入PBS溶液,4个干预组胰蛋白酶的终浓度均为10.0 nmol/L,相应的干预时间分别为3、6、12及24 h)的胰蛋白酶干预后,检测MKN28细胞中VEGF m RNA及其蛋白的表达水平,并检测培养液中VEGF蛋白的浓度。2将MKN28细胞分别给予PBS溶液(空白对照组)、胰蛋白酶、胰蛋白酶+PD98059、胰蛋白酶+SB203580、PD98059及SB203580处理,检测MKN28细胞中VEGF
m RNA及其蛋白的表达水平。细胞中VEGF m RNA及其蛋白表达水平的检测分别采用荧光定量PCR法和Western blot法,培养液中VEGF蛋白浓度的检测采用酶联免疫吸附实验(ELISA)。结果 BAY 73-4506研究购买 1胰蛋白酶浓度的影响。与空白对照组比较,0.1、1.0、10.0及100.0 nmol/L组细胞中VEGF m RNA及其蛋白的表达水平均较高(P0.05)。空白对照组、0.1 nmol/L组、1.0 nmol/L组、10.0 nmol/L组及100.0 nmol/L组培养液中VEGF蛋白的浓度逐渐递增(P0.05)。空白对照组、3 h组、6 h组、12 h组及24 h组培养液中VEGF蛋白的浓度逐渐递增,5组间两两比较差异均有统计学意义(P0.05),但胰蛋白酶组细胞中VEGF m RNA及其蛋白的表达水平均较其余5组相应指标高(P
目的探讨细胞外信号调节激酶/p38丝裂原活化蛋白激酶(ERK/p38MAPK)信号通路在参苓白术散调控脾虚湿困型溃疡性结肠炎大鼠结肠组织水通道蛋白(aquaporin,AQP)3、AQP4表达中的作用。方法将60只Wistar大鼠按照随机数字表均分为正常组、模型组(氯化钠注射液)、参苓白术散组、U0126+参苓白术散组、SB203580+参苓白术散组。除正常组外,脾虚湿困型溃疡性结肠炎大鼠采用2,4,6-三硝基苯磺酸/乙醇灌肠,结合环境与饮食干预复制。14 d后采用蛋白质印迹法检测各组大鼠结肠组织AQP3、AQP4蛋白的表达,实时荧光定量PCR法检测其mRNA表达情况。结果模型组大鼠AQP3、AQP4蛋白表达及其mRNA的表达水平明显低于正常组(P<0.05),参苓白术散组大鼠结肠组织AQP3、AQP4蛋白及mRNA表达较模型组明显升高,组间比较有显著性差异(P<0.05),SB203580+参苓白术散组及U0126+参苓白术散组大鼠结肠组织AQP3、AQP4蛋白及mRNA表达较模型组有较小幅度升高,与正常组和参苓白术散组相比均有显著性差异(P
目的探讨p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)抑制剂在葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导的溃疡性结肠炎大鼠肠道动力障碍中的作用。方法 34只Sprague-Dawley大鼠用随机数字表法随机分成4组:正常对照组(正常组,n=8),DSS模型组(DSS组,n=8),DSS+生理盐水(NS)组(DSS+NS组,n=9),DSS+SB203580干预组(SB203580组,n=9)。除正常组外,所有大鼠每日饮用5%DSS溶液,SB203580组大鼠在饮用5%DSS溶液72
Angiogenesis抑制剂 h以后,每天予以SB203580(1 mg/kg体质量)进行腹腔注射,观察各组大鼠的疾病活动指数(DAI),以酚红法测定大鼠结肠传输功能。结果 1 DSS组和DSS+NS组大鼠的DAI评分明显高于正常组,SB203580组DAI评分明显降低,但仍然高于正常组(P0.05)。2与正常对照组比较,DSS组和DSS+NS组大鼠的结肠传输功能明显延迟,经SB203580干预后,其结肠传输功能明显改善(P0.05)。结论 SB203580能阻断p38MAPK信号转导通路,改善DSS诱导的结肠炎症,从而改善结肠传输功能。
目的:观察P38丝裂原活化蛋白激酶(p38 ABT-263 花费 mitogen-activated protein kinase,p38 MAPK)抑制剂SB203580对TNF-α诱导的原代培养大鼠小胶质细胞高迁移率族蛋白B1(high mobility
group protein B1,HMGB1)表达的影响。方法:采用原代培养大鼠小胶质细胞,设立对照组、TNF-α组(25 ng/m L)、TNF-α(25 ng/m L)+SB 203580组(10μmol/L)、SB203580组(10μmol/L),各组细胞经药物处理16 h后分别用ELISA法检测细胞培养上清中HMGB1的表达情况,Western印迹检测细胞HMGB1和磷酸化p38MAPK表达情况,用反转录PCR检测HMGB1 m RNA表达。结果:经TNF-α刺激后,大鼠小胶质细胞及其培养上清液中HMGB1蛋白表达增高;SB 203580可抑制TNF-α诱导的磷酸化p38 MAPK表达(P
目的探讨P38MAPK通路对肝癌细胞增殖的影响.方法描绘生长曲线、MTT、台盼兰染色、共聚焦显微镜、Western Blot和原位细胞凋亡检测.研究正常肝细胞、癌周肝硬化细胞和肝癌细胞3株细胞在P38MAPK通路阻断前后增殖情况变化.结果 P38MAPK抑制剂对肝癌细胞的增殖影响最大,随着抑制剂浓度增加,增殖越明显.而对癌周肝细胞和正常肝细胞表现为低浓度促进增殖,高浓度抑制增殖.结论阻断P38MAPK的活化可以促进肝癌细胞的增殖.
目的研究天山雪莲愈伤组织提取物(extract from callus of Saussureainvolucrate,ESI)对人成骨肉瘤细胞MG-63增殖及分化的影响,探讨ESI抗骨质疏松的作用及机制。方法以MG-63为研究对象,采用MTT法和乳酸脱氢酶(LDH)法检测ESI对成骨细胞增殖的影响,相关试剂盒检测碱性磷酸酶(ALP)活性和羟脯氨酸(Hyp)水平,茜素红染色法观察对矿化骨结节形成的影响;实时荧光定量PCR(RT-PCR)检测骨保护素(OPG)和核因子-κB活化因子受体配体(RANKL)基因表达水平;Western blotting法检测OPG/RANKL蛋白水平;检测p38特异性抑制剂SB203580对ESI作用于成骨细胞增殖、分化、矿化以及OPG/RANKL表达的影响。结果 ESI低于125μg/mL对成骨细胞无细胞毒性,31.25、62.