17，与LIP+BI组相比，HG明显升高（P＜0.01），ND值明显降低（P＜0.01）。上述结果表明，肢体缺血预处理明显减轻了大鼠全脑缺血再灌注引起的海马CA1区迟发性神经元死亡、发挥了脑保护作用，而分别或联合切断双侧股神经和坐骨神经均可以部分阻断LIP的上述脑保护作用，提示神经途径参与了LIP诱导的脑缺血耐受。

TUNEL染色结果显示，脑缺血的sham组海马CA1区偶有棕黄色深染的TUNEL阳性细胞，神经元体积变小，核固缩，呈圆点状或扇形，染色质呈新月形或条形聚集于核周。脑缺血组海马CA1区可见大量的TUNEL阳性细胞，与sham组相比细胞数目明显增加（P＜0.01），提示8min的全脑缺血对大鼠海马CA1区锥体细胞的打击是致命的，引起大量的神经元细胞凋亡。LIP+BI组TUNEL阳性神经元数与脑缺血组相比明显减少（P＜0.01），说明LIP明显抑制全脑缺血引起的海马CA1区锥体细胞凋亡，诱导了脑缺血耐受。与LIP+BI组相比，FNS+LIP+BI组、SNS+LIP+BI组和FNS+SNS+LIP+BI组，海马CA1区TUNEL阳性细胞数明显增加，表明分别或联合切断双侧股神经和坐骨神经可拮抗LIP抑制凋亡的作用。 因为 2股神经和或坐骨神经在肢体缺血预处理上调海马CA1区p38MAPK表达中的作用 90只Wistar大鼠永久凝闭双侧椎动脉恢复两天后，随机分为以下9组：①全脑缺血的sham组（n=10）：只暴露双侧颈总动脉，不阻断血流；②全脑缺血组（brain ischemia, BI）（n=10）：夹闭双侧颈总动脉8min后恢复再灌注；③LIP+BI组（n=10）：夹闭双侧股动脉10min、再灌注10min、反复3次作为肢体缺血预处理后，即刻夹闭双侧颈总动脉8min作为损伤性缺血，然后恢复再灌注；④股神经切断（femoral nerve resection, FNS）+全脑缺血组（n=10）：切断双侧股神经，即刻给予8min全脑缺血；⑤股神经切断+LIP+全脑缺血（FNS+LIP+BI）组（n=10）：LIP前切断双侧股神经，即刻给予8min全脑缺血。⑥坐骨神经切断（sciatic nerve resection,SNS）+全脑缺血组（n=10）：切断双侧坐骨神经，即刻给予8min全脑缺血；⑦坐骨神经切断+LIP+全脑缺血（SNS+LIP+BI）组（n=10）：LIP前切断双侧坐骨神经，即刻给予8min全脑缺血；⑧股神经切断+坐骨神经切断+全脑缺血（FNS+SNS+BI）组（n=10）：切断双侧股神经及双侧坐骨神经，即刻给予8min全脑缺血；⑨股神经切断+坐骨神经切断+LIP+全脑缺血（FNS+SNS+LIP+BI）组（n=10）：LIP前切断双侧股神经及双侧坐骨神经，即刻给予8min全脑缺血。以上各组大鼠在sham手术或末次缺血再灌注12h断头取脑，各组分别取5只用于免疫组织化学、5只用于Western

EX527 blotting，检测大鼠海马CA1区p-p38MAPK的表达。 免疫组化结果显示，全脑缺血的sham组和全脑缺血组海马CA1区p-p38MAPK阳性表达较少，阳性细胞胞核着色，呈棕黄色，染色浅，积分光密度分别为3.37±0.12、3.30±0.03，阳性细胞总面积分别为6056.23±522.3、6106.62±458.43（μm2,下同）。LIP+BI组海马CA1区神经元p-p38MAPK的表达明显增多，胞核着色加深，呈深棕黄色，其积分光密度和阳性细胞总面积分别为11.90±0.27和12036.60±693.91，与BI组相比有显著的统计学意义（P<0.01），表明LIP能够上调脑缺血大鼠海马CA1区p-p38MAPK的表达。与LIP+BI组相比，FNS+LIP+BI组海马CA1区神经元中p-p38MAPK的表达量较少，胞核染色较浅，有显著统计学差异（P<0.01），其积分光密度和阳性细胞总面积分别为4.63±0.07和6561.17±301.5。SNS+LIP+BI组海马CA1区神经元中p-p38MAPK的表达量降低，与LIP+BI组相比，阳性细胞积分光密度（5.07±0.13）和阳性细胞总面积（6835.91±401.47）均有明显统计学差异（P<0.01）。FNS+SNS+LIP+BI组海马CA1区神经元中p-p38MAPK的表达量少，胞核着色浅，阳性细胞积分光密度和总面积分别为3.15±0.22和6361.81±210.41，与LIP+BI组相比有明显统计学差异（P<0.01）。FNS+LIP+BI组、SNS+LIP+BI组和FNS+SNS+LIP+BI组中p-p38MAPK的表达量较少，与LIP+BI组相比有统计学差异（P
目的： Alisertib体内 探讨硫酸镁对人脐静脉血管内皮细胞（HUVEC）细胞经60Co γ射线照射后细胞增殖、周期、凋亡的影响，并分析其可能的机制。同时观察硫酸镁对胶质瘤U251细胞照射后细胞周期、凋亡的影响。研究结果为硫酸镁的临床应用提供实验依据和支撑。 方法： 1、取对数生长期的HUVEC细胞，采用CCK-8法检测硫酸镁对细胞存活率及增殖的影响，筛选合适浓度的硫酸镁。用流式细胞仪检测细胞周期分布和AnnexinV/PI双染色法检测细胞凋亡情况。 2、用NO试剂盒和SOD试剂盒分别测定NO含量和SOD活性，硫代巴比妥酸法（thiobarbituric acid,TBA）测定丙二醛（malondialdehyde,MDA）含量变化。 3、Real-Time PCR方法检测ICAM-1mRNA、NF-κB mRNA表达。 4、不同浓度的硫酸镁预处理对数生长期的脑胶质瘤U251细胞，经γ射线照射后不同时间点收集细胞，采用流式细胞仪检测细胞周期、细胞凋亡率的变化。 5、数据分析采用SAS8.