2.MMP-9. Fascin. Ezrin表达的影响尚不明确。 化疗已作为常规方案列入肺癌的综合治疗,对降低肿瘤术后复发和转移的几率有一定积极意义。近年来,随着肺癌患者在围术期使用铂类药物化疗愈来愈普遍,麻醉药物是否会影响化疗药物的效果也日渐受到关注。研究表明,七氟醚可减弱顺铂对艾氏腹水肿瘤细胞的毒性作用,但七氟醚是否会影响顺铂对人肺腺癌A549细胞的抗癌效应尚不明确。 本研究采用七氟醚作用于体外培养的人肺腺癌A549细胞,并对以下三个方面进行研究：①探讨七氟醚对人肺腺癌A549细胞生长的影响及有关分子机制；②探讨七氟醚对人肺腺癌A549细胞转移能力的影响及有关分子机制；③探讨七氟醚对人肺腺癌A549细胞化疗敏感性的影响及有关分子机制。阐明上述问题将为临床麻醉工作提供一定指导意义。

第一章七氟醚对人肺腺癌A549细胞增殖、凋亡及有关分子表达的影响 目的观察不同浓度七氟醚对人肺腺癌A549细胞增殖、凋亡的影响,并探讨有关分子机制。 购买PR-171 方法人肺腺癌A549细胞接种于培养板,培养24h后,随机分为4组：对照组(C组,0%七氟醚)、1.7%七氟醚组(S1组)、3.4%七氟醚组(S2组)、5.1%七氟醚组(S3组)。S1、S2、S3组的A549细胞分别用1.7%、3.4%、5.1%七氟醚处理2、4、6h。C组不接受七氟醚处理。四组处理结束后,继续培养48h。于48h时,采用MTT法、平板克隆实验、流式细胞仪分别检测各组A549细胞处理2、4、6h后的增殖抑制率、克隆形成率、凋亡率。免疫印迹法检测各组A549细胞处理4h的XIAP,Survivin,Bcl-2,Bax,Caspase-3蛋白表达水平。 Selleckchem Ribociclib 统计学处理采用SPSS13.0统计学软件进行分析,计量资料以均数±标准差(x±s)表示,增殖抑制率、克隆形成率、细胞凋亡率的比较采用两因素析因设计方差分析。XIAP、Survivin、Bcl-2、Bax、Caspase-3蛋白表达的组间比较采用单因素方差分析。组间多重比较采用LSD法(方差齐)或Dunnett’s T3法(方差不齐)。PS2组(P处理4h的增殖抑制率>处理2h的增殖抑制率(P<0.05)；七氟醚处理时间的单独效应分析显示：S1、S2、S3组处理6h的克隆形成率<处理4h的克隆形成率<处理2h的克隆形成率(P0.05)

3.各组A549细胞凋亡率的比较。经析因分析发现,七氟醚处理浓度各组间凋亡率的差异有统计学意义(F=278.064,P=0.000)。七氟醚处理时间各组间凋亡率的差异有统计学意义(F=94.230,P=0.000)。七氟醚处理浓度与七氟醚处理时间这两个因素存在交互效应(F=11.440,P=0.000)。七氟醚处理浓度的单独效应分析显示：与c组比较,各个处理时间的S1、S2、S3组细胞凋亡率均依次增加(P处理4h的细胞凋亡率>处理2h的细胞凋亡率(P0.05)。 4.各组A549细胞XIAP, Survivin, Cleaved Caspase-3蛋白表达水平的比较。与C组比较,S1、S2、S3组XIAP, Survivin蛋白表达依次下调(P0.05)。 结论七氟醚能抑制A549细胞增殖,促进A549细胞凋亡。该效应与下调XIAP、urvivin蛋白表达,上调Cleaved

Caspase-3蛋白表达有关。 第二章七氟醚对人肺腺癌A549细胞的细胞周期及有关分子表达的影响 目的观察不同浓度七氟醚对人肺腺癌A549细胞的细胞周期影响,并探讨有关分子机制。 方法人肺腺癌A549细胞接种于培养板,培养24h后,随机分为对照组(C组,0%七氟醚)、1.7%七氟醚组(S1组)、3.4%七氟醚组(S2组)、5.1%七氟醚组(S3组)。S1、S2、S3组的A549细胞分别用1.7%、3.4%、5.1%七氟醚处理4h。C组不接受七氟醚处理。四组处理结束后,继续培养48h。于48h时,采用流式细胞仪检测各组A549细胞的细胞周期比例变化。免疫印迹法检测各组A549细胞处理4h后的Cyclin 因为 A, Cyclin B1, Cdc2蛋白的表达水平。 统计学处理采用SPSS13.0统计学软件进行分析,计量资料以均数±标准差(x±s)表示,组间比较采用单因素方差分析。组间多重比较采用LSD法。P<0.05)。Sev+SB组侵袭细胞数目显著低于其他3组(P<0.05)。Sev+SB组的细胞迁移率显著低于其他3组(P<0.05)。Sev+SB组p38MAPK磷酸化水平显著低于其他3组(P<0.05)Sev+SB组MMP-2蛋白表达显著低于其他3组(P<0.05)。Sev+SB组MMP-9蛋白表达显著低于其他3组(P<0.05)。Sev+SB组Fascin蛋白表达显著低于其他3组(P<0.05)Sev+SB组Ezrin蛋白表达显著低于其他3组(P<0.05)。Sev+DDP组侵袭细胞数目显著低于其他3组(P<0.05)。Sev+DDP组MMP-2蛋白表达显著低于其他3组(P<0.05)。Sev+DDP组的细胞迁移率显著低于其他3组(P<0.05)。Sev+DDP组Ezrin蛋白表达显著低于其他3组(P<0.