05): 3.健心汤可改善心衰大鼠病理形态结构,高剂量组和培垛普利组较低剂量组更佳。 4.健心汤治疗后,心衰大鼠的Ⅰ型胶原含量、Ⅰ/Ⅲ型胶原比值、CVF降低(P＜0.05),且在高剂量组与培垛普利组较低剂量组降低更明显(P＜0.05)。 5.健心汤治疗后,心衰大鼠AngⅡ、ET和NT-proBNP水平均降低(P均＜0.05),但培垛普利组AngⅡ水平较低剂量组和高剂量组更低(P＜0.05);ET和NT-proBNP水平在高剂量组和培垛普利组无显著性差异(P＞0.05),均低于低剂量组(P＜0.05)。 6.健心汤治疗后,p-ERK_(1/2)、p38-MAPK蛋白水平较心衰对照组降低(P＜0.05),且在高剂量组与培垛普利组较低剂量组降低更明显(P＜0.05)。 结论:1.健心汤可改善心衰大鼠的心功能、心肌形态结构,是治疗心衰的有效制剂。 2.健心汤降低了心衰大鼠Ⅰ型胶原、Ⅰ/Ⅲ胶原比值、CVF水平,提示健心汤可能通过调节胶原的表达抗心肌重塑。

无 3.健心汤降低了心衰大鼠AngⅡ、ET、NT-proBNP水平,提示健心汤可以拮抗心衰大鼠神经内分泌系统的过度激活。 4.健心汤下调了心衰大鼠p-ERK_(1/2)、p38-MAPK蛋白表达水平,提示健心汤可能通过干预了细胞信号转导系统的ERK、p38通路,通过相关的级联信号分子达到抗心肌重塑的作用。 5.高剂量健心汤对心功能的改善和抗心肌重塑的作用在6周内与培垛普利大致相当。
目的 观察电针对心肌梗死并抑郁模型大鼠行为学和海马神经元可塑性的影响,探讨心梗并抑郁动物模型建立方法、心梗并抑郁可能的发病机制,及电针作用机理。方法 1.将成年雄性Sprague-Dawley大鼠随机分为正常对照组、假手术对照组、心肌梗死并抑郁模型对照组、电针试验组和氟西汀对照组。在急性心肌梗死模型基础上,选用21天慢性轻度不可预见性应激加孤养造模。2.造模后的第1,7,14和21天,分别观察电针对各组大鼠敞箱实验、液体消耗等行为学指标的变化。3.应用TUNEL方法检测海马神经细胞元凋亡。4.采用免疫组化法观察大鼠海马神经元Bc1-2和Bax阳性细胞数和灰度值。5.RT-PCR技术检测大鼠海马BDNFmRNA,CREBmRNA和ERK1/2mRNA表达的差异。6.运用Western-blot检测大鼠海马BDNF,P-CREB和p-ERK1/2蛋白表达量的差异。结果

Selleckchem Alisertib 1.心梗后并经21天慢性轻度不可预见性及孤养应激,模型组大鼠的体重增加缓慢,敞箱实验中的水平穿越格数、竖立次数、理毛时间显著减少,中央格停留时间、粪便粒数增加;总液体消耗、糖水消耗明显下降,而纯水消耗显著增多,与正常组比较,均差异有显著性(P<0.05),提示慢性应激能够影响心梗后大鼠的体重和行为学指标;经过3周的治疗后,电针组和氟西汀组各项指标测值与模型组比较均有明显改善,差异有显著性(P0.05)。 3.免疫组化结果显示海马CA3区、齿状回均观察到细胞质被染成棕黄色的阳性细胞,CA1区未见阳性细胞表达。与正常组比较,模型组大鼠海马CA3区和齿状回Bax蛋白明显增加,Bcl-2蛋白和Bcl-2/Bax比值明显减少,差异有显著性(P0.05)。 4.RT-PCR检测结果显示,与正常组比较,模型组大鼠海马BDNFmRNA,CREBmRNA和ERK1/2mRNA蛋白表达量明显减少(P0.05)。 5.Westen-blot检测结果显示,与正常组比较,模型组大鼠海马BDNF,P-CREB和p-ERK1/2蛋白表达量明显减少(P0.05)。结论 1.急性心肌梗死手术后结合慢性不可预见性轻度应激,可成功制作心梗并抑郁大鼠复合模型,该模型具备心肌梗死和抑郁双重特点,符合抑郁动物模型的评定标准。模型制作重复性好、症状稳定、持续时间较长,为心身疾病的基础研究提供了一个思路和方法。

2.电针治疗1周后,模型鼠体重和行为学指标无明显改善,经过3周的电针治疗,模型鼠的体重较前增加,行为学指标明显改善,说明电针3周时间才能逐步发挥有效的抗抑郁作用。 3.模型鼠海马CA3区、齿状回出现了细胞凋亡,且抗凋亡蛋白Bcl-2表达减少,促凋亡蛋白Bax表达增加,二者比值降低,给予电针干预3周后,Bcl-2表达增加,Bax表达减少,二者比值增高,提示心梗并抑郁的发生与海马神经元凋亡有关,电针通过抗凋亡机制,对海马神经元细胞起保护作用。 4.模型鼠海马BDNF表达下调、P-CREB水平降低,推测心梗并抑郁与海马功能异常有关,存在神经可塑性降低,神经元细胞受损的表现。3周的电针治疗可显著上调大鼠海马内P-CREB水平,提高BDNF的水平,可能是电针抗抑郁、保护海马神经元细胞的分子机制之一。 5.模型鼠海马p-ERK1/2水平降低,反映出心梗并抑郁存在ERK信号通路异常,本研究中电针治疗3周后,p-ERK1/2水平显著增高,提示电针可以激活ERK信号通路,通过相关ERK信号级联中的关键分子发挥抗抑郁作用。
本课题主要探讨二丁酰环腺苷酸(dbcAMP)对肥育猪胴体品质和肉质的影响及作用机理,主要包括动物饲养试验、脂肪前体细胞培养试验和骨骼肌卫星细胞培养试验三部分。 动物饲养试验:选用72头平均体重约60kg的杜×大×长肥育阉公猪,随机分为3个处理,每个处理6个重复,每个重复4头猪。对照组饲喂基础日粮,试验组在基础日粮中分别添加10mg/kg和20mg/kg dbcAMP(纯度98%),自由采食和饮水,饲养至90kg左右结束试验,每重复随机选出1头猪屠宰,研究dbcAMP对肥育猪生产性能、胴体品质和肌肉品质的影响。结果表明:1)饲粮添加dbcAMP未显著影响肥育猪平均日增重、日采食量和料重比(P>0.05)。2)添加10mg/kg Selleck Tariquidar dbcAMP显著降低肥育猪宰后花板油所占比例和第一肋骨处的背膘厚(P0.05),而前腿和后腿肌肉所占比例有所下降(P>0.05)。4)随着dbcAMP添加量的增加,肥育猪背部脂肪细胞直径分别降低了4.37%和7.68%(P0.05)。6)饲粮添加dbcAMP对肥育猪背最长肌、股二头肌和半腱肌的pH值、肉色、大理石纹、嫩度和肌内脂肪均无显著影响(P>0.05),添加10mg/kg dbcAMP显著降低了股二头肌宰后24h的滴水损失值(P0.05)。7)添加10mg/kg dbcAMP显著提高了背脂中激素敏感脂酶(HSL)活性、β肾上腺素受体(β-AR)、生长激素受体(GHR)mRNA表达量(P<0.05)和降低胰岛素受体(INSR)mRNA表达量(P<0.05)。2)dbcAMP对脂肪前体细胞分化的影响也存在添加浓度和处理时间效应,短期处理(2~6天)时细胞的分化呈先下降再上升的二次曲线变化(P<0.05)。3)向脂肪前体细胞培养液中添加dbcAMP显著提高了细胞内cAMP含量、PKA活性(P0.05),1~1000μmol/L时有抑制细胞增殖的趋势,且1000μmol/L组的抑制增殖作用最大(P<0.05)。2)向骨骼肌卫星细胞培养液中添加dbcAMP显著提高了cAMP含量、AC活性(P<0.05);显著降低了calpain活性(P0.

05),血小板有增高趋势。3、BALF中有核细胞计数和分类结果显示照射组与TGF-β3组BALF中细胞总数和中性粒细胞数有增高的趋势,但统计学无显著差异。液体悬浮芯片细胞因子检测结果显示照射后小鼠BALF中趋化因子有先增高后降低的趋势。而TGF-β3组促炎因子IL-12分泌增多、抑炎因子IL-4分泌减少。照射组的促炎因子IL-17随着照后时间延长有增加的趋势,其中在照后6个月显著高于对照组(P<0.05),而TGF-β3组的IL-17变化情况跟照射组正好相反,在照后1个月时显著增加(P<0.05),随后降低并恢复至正常水平。生长因子中,照射组和TGF-β3组的FGF-basic在照后出现了先增高再降低最后恢复的波动情况。照射组的VEGF在照后有增高的趋势,其中在照后1个月和照后6个月时与对照组相比显著增加(P<0.05)。4、照射能够引起照射组小鼠出现肺泡壁增厚、肺泡间隔明显增宽、成纤维细胞大量增生、肺泡结构严重破坏、胶原纤维大量沉积的典型纤维化病理改变。给予TGF-β3组小鼠病理变化比照射组出现的晚且程度较轻,同时胶原沉积减少,但仍然可见炎性淋巴细胞浸润,蛋白样液体渗出,局部肺泡萎陷,部分肺泡腔融合扩大,局部肺泡间隔增宽,以及部分绿染的胶原纤维。5、免疫组化结果显示照射后小鼠肺内MMP-9、TIMP-1表达与对照组相比均明显增加,其中MMP-9随照后时间的延长增加的更为显著,TGF-β3组MMP-9表达显著高于照射组(P<0.05)。TIMP-1随照后时间延长变化趋势不明显。6、照射组小鼠从照后1个月起肺内循环纤维细胞明显增加(P<0.05),随照后时间的延长,出现降低,但仍高于对照组(P<0.05)。照后1个月时,TGF-β3组循环纤维细胞数明显低于照射组(P<0.05),与对照组相比仍有增高(P<0.05);3m时与照射组水平接近;而6个月时低于照射组,恢复至对照组水平。7、照射组和TGF-β3组外周血Treg细胞比例随着照后时间的延长有降低趋势,但与对照组相比无明显差异。照射组肺内Th17细胞比例均显著高于对照组(P<0.05),而且随着照后时间延长而增高。而TGF-β3组变化规律和照射组相反,Th17细胞比例随着照后时间延长而降低,在照后1个月达到高峰,且显著高于照射组(P<0.05),到了照后6个月时,虽然仍然显著高于对照组(P<0.05),但已经显著低于照射组(P<0.05)。照射组肺内Treg细胞比例均显著高于对照组(P<0.05),而且随着照后时间延长而降低。而TGF-β3组Treg细胞比例随着照后时间延长而波动,其中在照后3个月达到高峰,且显著高于照射组(P<0.05),到了照后6个月时,与对照组相比已经无明显差异并且显著低于照射组(P
严重烧伤早期即可发生全身性炎症反应,而TGF-β_1/Smads信号通路与炎症调控密切相关。基于上述背景,本研究探讨了TGF-β_1/Smads信号通路在严重烧伤早期炎症反应中的作用。在30%TBSAⅢ°大鼠烧伤模型中发现以特异性阻滞剂SB431542抑制TGF-β_1/Smads信号通路的转导活性,显著降低了烧伤后促炎细胞因子TNFα、IL-1β、IL-6和细胞粘附分子E-Selectin、ICAM-1、CD11b的表达。严重烧伤后Smads的转导活性在4h～8h受到抑制,加用SB431542强化了这种抑制。抑制Smads活化可以减轻严重烧伤后肺脏损伤、降低肺组织含水量和血管通透性。实验表明TGF-β_1/Smads信号通路参与严重烧伤早期的炎症调控,烧伤后TGF-β√Smads信号通路的短暂抑制可能出自机体的自我保护机制。
TGF-β具有调节细胞周期的作用,对多种细胞具有生长抑制作用。本研究从角质细胞入手,采用TGF-β转导分子Smad4条件基因敲除小鼠,并在活体体和组织块培养条件下应用TGF-β受体抑制剂SB431542,应用免疫组织化学等方法,证实阻断TGF-β通路可以加速小鼠烧伤和切割伤的愈合。应用细胞培养技术,采用XTT法和流式细胞仪分析法,证实了在离体培养条件下,TGF-β1对小鼠角质细胞生长的抑制作用影响,和其受体抑制剂SB431542对其作用的去除作用。
目的:研究基质金属蛋白酶(MMP)在急性胰腺炎(AP)肺损伤(APALI)与炎症后组织重建中的作用及机制。方法:应用雨蛙素、L-精氨酸制备大鼠急性水肿型胰腺炎(AEP)模型和急性坏死型胰腺炎(ANP)模型,应用免疫组化、明胶电泳及Western

CB-839化学结构 以及 PR-171浓度 blot等技术,研究MMP在APALI和组织重建中的变化及可能机制。结果及结论:MMP-9在鼠和人APALI时胰腺和肺脏组织中的表达为阳性,且鼠ANP组强于AEP组,提示MMP-9在APALI的发病中可能起着重要作用。MMP抑制剂可以减轻AP时胰腺及远处靶器官的损害,为临床治疗APALI提供了可能的治疗思路。TGFβ1、P-smad3、MMP-2在AP炎症后胰腺组织中表达明显增强,且鼠ANP组比AEP组的表达强且持久,提示TGFβ-smad3通路、MMP-2在AP炎症后胰腺组织修复重塑中起着重要作用,且TGFβ可能上调MMP-2的表达,对这一通路进行干预可能有助于减轻胰腺ECM的过度沉积和促进ANP胰腺组织重建,降低急性炎症慢性化的可能。
各种癌症、重要脏器的纤维化病变等疾病是人类的主要死因和医药资源的主要主要消耗者。最新的研究表明,TGFβ信号的异常与这些疾病高度相关,而TGFβ信号通路中的重要节点TypeⅠ受体(ALK5)是治疗这些疾病的理想靶标。 本论文基于ALK5激酶功能区的晶体结构,参照p38-MAPK与SB203580复合物的结构特点,将已知的阳性化合物SB-431542与ALK5激酶功能区对接,得到SB-431542/ALK5复合物的模型。在分析两者结合模式的基础上,设计合成了1,3,5-三取代吡唑,1,2,4-三芳基咪唑,1,3,4-三芳基吡唑啉-5-酮和1,3,5-三取代吡唑啉等4大类共84个化合物。经~1H-NMR、NOE和MS,IR等光谱鉴定,辅以必要的化学法结构验证,确证了它们的化学结构。所有化合物都是未见于文献报道。 本实验室利用化合物对TGFβ诱导的荧光素酶报告基因表达的影响测定了所合成的目标化合物对ALK5激酶的抑制活性。试验结果显示大部分送筛化合物均有一定的ALK5激酶的抑制活性。从中发现高活性化合物1个(LXZ804),ALK5抑制率69%(1uM),与SB-431542接近,中等活性化合物9个(抑制率>30%,1uM)。用人胚胎肺细胞MTT法对部分活性化合物进行了毒性试验,结果显示,在30μM剂量下,大部分活性化合物的毒性小于阳性化合物。 依据我们对接得到的SB-431542/ALK5复合物结构和对试验结果所作的分析,结合文献报道的晶体结构信息,进行了初步的SAR分析,并勾勒出了较完善的SB431542与ALK5结合模式,以指导我们关于下一步的ALK5抑制剂的设计与合成工作。
目的 1.

检测弥慢性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)户Y_盒结合蛋白1(YB-1)的表达情况,探讨其与肿瘤细胞耐药、化疗疗效及预后的关系。2.体外诱导Daudi细胞多药耐药的形成,检测YB-1基因沉默前后Daudi细胞中mdr1基因诱导性表达和细胞耐药特征形成的差异,探讨YB-1蛋白在诱导性多药耐药形成中的作用。3.探讨阿霉素诱导Daudi细胞耐药过程中,YB-1核易位与核蛋白同mdr1启动子Y-box序列结合活力、mdr1基因启动子转录活性以及MAPK/ERK信号通路活化的关系。

方法：1.采用Envision两步法检测DLBCL和反应性淋巴结增生(RLH)石蜡标本中YB-1、磷酸化ERK(pERK)和P-gp的表达,分析YB-1的核定位与细胞P-糖蛋白(P-glycoprotein, P-gp)、pERK的相关性,并探讨其与临床参数的关系。2.构建针对人YB-1的特异性shRNA真核表达载体：把被9 bp序列间隔的针对YB-1不同靶序列的三个19 bp的反向重复序列及随机片段,插入携带人U6SnRNA启动子的pGensil-1质粒载体中,分别用PstⅠ和SalI酶切鉴定,并将酶切鉴定正确的重组质粒作测序分析。3.采用脂质体介导的方法将三种人YB-1基因特异性shRNA及随机片段的真核表达载体(YBX1、YBX2、YBX3、pGenesil-1/con)转染进Daudi细胞中,G418抗性筛选两周后获得阳性克隆。取YB-1基因干扰效果最好的细胞株进行后续实验,以转染随机片段的细胞株(Daudi/c)为对照组。4.阿霉素间歇性长期作用于Daudi细胞,诱导细胞耐药,RT-PCR方法检测YB-1、mdr1基因表达情况,FCM检测各组细胞mdr1基因编码的P-gp的表达水平,Western blotting法检测诱导过程中YB-1蛋白表达及其核易位的变化情况,四唑蓝(MTT)比色法检测各组细胞的生长抑制率(IR)与IC50值,细胞内罗丹明123(Rho123)潴留实验检测P-gp的功能状态。5.采用凝胶迁移滞后实验(EMSA)方法检测各实验组核蛋白与mdr1启动子Y-box序列的结合活性。6.采用染色质免疫沉淀(chromatin

http://www.selleckchem.cn/products/bmn-673.html immunoprecipitation, ChIP)实验来进一‘步证实YB-1与mdrl启动子Y-box序列在细胞内特异性结合。7.合成mdrl基因启动子片段以及YB-1结合位点突变序列,克降到荧光素酶报告基因载体PGL3-Basic中,构建pMDR-luc和突变pMDR-Ym-luc重组载体；川脂质体将重组的报告基因载体与内参质粒p-半乳糖苷酶(β-gal)瞬时共同转染Daudi细胞,荧光素酶活性分析mdr1基因启动子活性的改变。8.运用MAPK抑制剂PD98059预处理Daudi细胞1小时后,再加入阿霉素诱导耐药(诱导方法同上),Western selleck化学药品 blotting法检测ERK蛋白及其磷酸化情况、YB-1蛋白表达及其核易位的变化。RT-PCR检测mdr-1, YB-1基因表达,FCM检测P-gp的表达情况。 结果：1.DLBCL组与RLH组的YB-1胞浆阳性表达率差异无显著性(P=0.763),而DLBCL组的YB-1胞核阳性表达率明显高于RLH组(P＜0.05); DLBCL临床Ⅲ-Ⅳ期、结外淋巴组织侵犯及骨髓浸润患者的YB-1胞核阻性表达率和pERK表达强度明显高于Ⅰ～Ⅱ期、结内病变及无骨髓浸润患者,差异有显著性(P<0.005)均呈正相关；化疗有效组的YB-1核阳性和pERK表达强度表达率明显低于化疗无效组(P<0.038)；化疗有效组的P-gp表达强度显著低于化疗无效组(P
血管生成在胚胎发育、机体稳态的维持、创伤修复、以及女性生理周期等生理过程中发挥着重要的作用。而且血管生成异常与多种疾病相关,包括缺血性疾病、慢性炎症以及恶性肿瘤等。促血管生成能力是非肿瘤组织细胞发生恶性转化所必须的,是重要的肿瘤恶性标志之一。对肿瘤血管生成的不断深入研究,为临床肿瘤治疗带来了许多新途径。肿瘤血管生成机制复杂多样,是目前肿瘤研究的热点问题之

Gadd45a是一种DNA损伤诱导基因,可被多种应激损伤诱导表达,包括紫外线照射、电离辐射、血清饥饿、化疗药物作用等。Gadd45a可诱导细胞周期阻滞、细胞凋亡、DNA损伤修复等。此外研究发现,Gadd45a具有多种抑瘤活性,参与维持基因组稳定性,降低MMPs转录表达,维持细胞接触性抑制和同型细胞间粘附,从而抑制细胞侵袭转移。 本研究通过体内体外实验证实Gadd45a可抑制肿瘤血管生成。Gadd45a失活可促进移植瘤内血管密度升高,增强鸡胚尿囊膜血管生成反应,以及在体外可显著增强内皮细胞迁移和成管能力。为了进一步研究Gadd45a调控血管生成的机制,我们对Gadd45a敲除和野生型的MEFs细胞进行了表达谱芯片分析,发现有五种促血管生成因子在Gadd45a敲除的MEF细胞中表达升高。其中VEGF-A是最重要的促血管生成因子,MMP3属基质金属蛋白酶,参与细胞外基质重塑。RealTime Epigenetics合成 Library购买 PCR和western blot证实VEGF-A和MMP3的变化与芯片结果相符。同时,我们发现在HeLa细胞中,敲降Gadd45a也可诱导VEGF-A和MMP3表达升高。进一步的研究发现,Gadd45a调控肿瘤血管生成与STAT3(?)目关。Gadd45a可抑制STAT3 Ser727的磷酸化。STAT3是一种重要的转录因子,其活性受到两个磷酸化位点的调节,包括Tyr705和Ser727位点。同时,VEGF-A和MMP3是STAT3调控的下游蛋白。上述结果提不,Gadd45a可通过抑制STAT3 Ser727的磷酸化,下调VEGF-A和MMP3表达。STAT3 Ser727的磷酸化可受到多种激酶调控,其中包括p38和mTOR。本研究发现mTOR特异性抑制剂Rapamycin可显著抑制这两株MEFs细胞STAT3 Ser727位点磷酸化。Pulldown实验证实GST-Gadd45a可结合mTOR,而不结合STAT3.

、动物实验动物分为对照组、模型组及治疗组,每组10只。采用皮下注射野百合碱建立肺动脉高压模型。正常对照组注射同等剂量生理盐水,L-精氨酸治疗组在野百合碱皮下注射后第2天开始给药,按100mg/kg剂量每日腹腔注射。每周监测尾动脉压,四周后颈外静脉插管检测肺动脉压力及右心室功能,并检测肺动脉舒张功能。高效液相色谱法检测血浆ADMA浓度；硝酸还原酶法测定血浆中NO浓度；RT-PCR法检测肺组织DDAH2mRNA的表达；免疫组化法检测肺动脉DDAH2蛋白的表达。 结果1、肺心病患者血浆ADMA浓度显著高于正常对照组(0.41±0.09vs 0.22±0.07μM,P<0.05);右心室肥厚明显(右心室／左心室+室间隔质量比(41.7%±6.6%vs26.3%±4.8%,P<0.05),血浆NO含量显著降低(23.4±3.5vs31.2±2.1)。L-精氨酸治疗后血浆ADMA浓度降低(0.28±0.08vs0.41±1.0μM,P<0.05)；血浆NO水平升高(29.1±3.1vs23.4±3.5μM,P
神经节苷脂(Gangliosides)是一类含唾液酸的鞘糖脂，存在于细胞膜的外表面。在胚胎形成、细胞分化、细胞增殖、转化和细胞转移等生理现象中发挥着重要作用。本文阐述了神经节苷脂GD1a的一种新的功能即诱导FBJ病毒感染的小鼠骨肉瘤细胞产生凋亡。在无血清培养条件下，富含GD1a的FBJ-S1细胞趋向死亡，而缺乏GD1a的FBJ-LL细胞却却未见明显影响。通过流式细胞仪对细胞进行膜联蛋白V异硫氰酸荧光素(FITC-AnnexinV)和碘化丙啶(PI)双染检测和细胞周期分析发现FBJ-S1细胞在无血清条件下趋向死亡是因凋亡而引起的。因此，我们推测GD1a可诱导FBJ细胞凋亡。为了验证这一推论，外源性GD1a在无血清培养条件下处理FBJ-LL细胞，发现FBJ-LL细胞出现死亡。FBJ-S1细胞通过加入葡萄糖苷神经酰胺合成酶抑制剂(D-PDMP)处理和转染入唾液酸转移酶(st3ga15)的siRNA的来抑制GD1a的合成，发现在无血清条件下经D-PDMP处理后FBJ-S1细胞抵抗死亡，且转染siRNA到FBJ-S1细胞后得到的单克隆细胞也同样抵抗死亡。另外，很多文章报道神经酰胺和神经节苷脂GD3可诱导凋亡，但在发生凋亡的FBJ细胞中神经酰胺的表达含量并没有变化，而GD3并未见在FBJ细胞中表达，这说明神经酰胺和GD3不是引起FBJ细胞凋亡的因素。

许多 PLX3397分子量 窖蛋白1(caveolin-1，亦译为小窝蛋白1)是一种肿瘤抑制蛋白。本文研究发现，窖蛋白1参与了GD1a诱导的FBJ细胞凋亡并起着关键作用。FBJ-S1细胞在无血清条件下趋向死亡，而FBJ-LL细胞并未出现此现象，逆转录PCR法检测发现FBJ-S1细胞中窖蛋白1的表达量是FBJ-LL细胞的5倍。FBJ-LL细胞在外源性GD1a处理后促进其趋向死亡，免疫印迹法(Western blot)发现窖蛋白1的表达量也明显增加。另外，利用siRNA技术沉降FBJ-S1细胞中窖蛋白1的表达量，无血清培养条件下，结果使其存活。数据表明窖蛋白1可促进FBJ细胞的凋亡。存活蛋白(survivin，亦译为生存蛋白或生存素)是一种凋亡抑制蛋白，研究发现窖蛋白1可以调节存活蛋白，且存活蛋白也参与了GD1a诱导的FBJ细胞凋亡。生长因子。因此我们随机检测了FBJ-LL和FBJ-S1细胞中一些生长因子的mRNA水平表达，发现FBJ-LL细胞中生长因子如PDGFα，TNFα和VEGFβ的表达量是FBJ-S1细胞中的数倍，且FBJ-S1细胞在无血清培养基中加入PDGFα或TNFα培养后使其存活。数据表明内源性GDla可调节生长因子的表达同时也可诱导凋亡。另外，通过信号传导抑制剂和细胞内吞抑制剂来研究GDla诱导FBJ细胞凋亡的机制，发现p38MAPK途径和细胞内吞途径对GDla诱导的细胞凋亡发挥着重要作用。
目的建立小鼠内毒素(即脂多糖,LPS)急性肺损伤(ALI)模型,动态观察槐定碱对小鼠内毒素性肺损伤模型的治疗作用,研究槐定碱对LPS信号转导途径中的识别受体-LBP、CD14、TLR4、胞内p38MAPK信号分子、核转录因子AP-1及主要炎症介质TNF-α、NO四个层次的影响,以探讨其抗内毒素的药理机制。 方法BALB/c小鼠随机分为6组,即正常对照组、内毒素肺损伤模型组、槐定碱治疗组[槐定碱高(12mg/kg)、中(6mg/kg)、低(3mg/kg)三个剂量]、槐定碱药物对照组(12mg/kg)。每组小鼠再分为2h、6h、12h、24h四个时相。以尾静脉注射内毒素7mg/kg制备急性肺损伤小鼠模型。各组小鼠分别在给予LPS或槐定碱后相应时间点,即2h、6h、12h、24h时记录一般状况并取材,肉眼及光镜观察肺组织的病理变化;以肺湿/干重(W/D)比值检测肺水含量;硝酸还原酶法测定血清一氧化氮(NO)含量;放射免疫分析法检测血清肿瘤坏死因子(TNF-α)含量;逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测肺组织中LBP、CD14、TLR4、c-jun、c-fos及TNF-α的mRNA表达水平;免疫组化SP法与免疫印迹法(Western-blot)检测肺组织中总p38MAPK、磷酸化p38

为什么 MAPK、TLR4蛋白的表达水平。 结果(1)内毒素肺损伤模型组小鼠在给予LPS后30分钟即有症状出现,至24h未见缓解;肉眼与光镜观察肺脏病理改变,发现6h起肺脏病理改变明显可见并逐渐加重,延至24h亦未见减轻;模型鼠肺组织W/D值显著升高;血清TNF-α和NO值均在给予LPS后2h即显著升高,并分别在6h和12h达到高峰,直至24h仍明显高于正常对照组(P <0.01)。模型组肺组织LBPmRNA、CD14mRNA与TLR4mRNA表达均在2h开始上调,于6h达高峰,至24h仍维持高水平。TLR4蛋白表达趋势与TLR4mRNA大致相似。免疫组化检测模型组各时相点的p38阳性细胞主要分布在气道黏膜上皮细胞、浸润的炎细胞和血管内皮细胞的胞浆中;磷酸化p38在上述细胞的胞浆与胞核中均呈强阳性表达,阳性细胞数和阳性信号均较正常对照组明显增多和增强,各时相点记分值均显著高于同时相点正常对照组(P<0.01或P<0.

2%(以3-氨基-2-噻吩甲酸甲酯计)。与文献报道的工艺相比,该路线操作简单、条件温和、收率较高,适用于工业化生产。
目的对一种用于治疗人类表皮生长因子受体2(HER2)阳性乳腺癌的抗人类表皮生长因子受体2人源化单克隆抗体靶向生物制剂的关键质量属性进行多维度评价研究。方法采用高效液相色谱、毛细管电泳、动态光散射、圆二色谱、差示扫描量热技术、液质联用技术、体外活性实验以及表面等离子共振(SPR)技术分别对抗人类表皮生长因子受体2抗体的纯度、杂质、结构、活性等关键质量属性进行多维度分析。结果该抗体的单体纯度>98%,聚体杂质97%,非糖重链杂质<1%;与参比生物制剂可比的圆二扫描图谱、二级结构预测结果和去折叠温度,N-糖修饰位点、种类和各糖分布比例与参比生物制剂高度相似;BT474增殖抑制活性、抗体依赖细胞介导的细胞毒性作用活性、抗原抗体亲和力、Fc受体亲和力等活性相关质量属性与参比生物制剂均无显著差异。结论该抗体高纯度、低杂质特性暗示其产品均一性和较低的安全风险,与参比生物制剂高度相似的高级结构、糖基化修饰和生物功能也从多个角度得到证实,这些正向质量评价是开展临床实验研究的前提,同时从某种程度上可以与临床安全和疗效指针建立关联。
酪氨酸激酶抑制剂伊马替尼在胃肠道间质瘤(GISTs)的治疗中已取得令人瞩目的疗效,然而伊马替尼继发耐药的出现成为亟待解决的临床难题。GISTs对伊马替尼继发耐药的可能机制包括KIT/PDGFRA基因二次突变、PTEN基因丢失、触发GIST细胞进入静止期等。针对上述耐药机制,目前已提出新型酪氨酸激酶抑制剂、联合应用下游通路靶向抑制剂、较少依赖KIT/PDGFRA途径的靶向抑制剂(KIT分子伴侣抑制剂、极光激酶抑制剂等)、诱导静止期GIST细胞凋亡等解决伊马替尼继发耐药的策略,本文就相关研究进展作一综述。
The

ZD6474浓度 phosphatidylinositol 3 kinase(PI3K)/AKT pathway is genetically targeted in more pathway components and in more tumor types than any other growth factor signaling pathway,and thus is frequently activated as a cancer driver.More importantly,the PI3K/AKT pathway is composed of multiple bifurcating 点击此处 and converging kinase cascades,providing many potential targets for cancer therapy.Renal cell carcinoma(RCC) is a high-risk and high-mortality cancer that is notoriously resistant to traditional FDA-approved Drug Library nmr chemotherapies or radiotherapies.The PI3K/AKT pathway is modestly mutated but highly activated in RCC,representing a promising drug

target.Indeed,PI3 K pathway inhibitors of the rapalog family are approved for use in RCC.Recent large-scale integrated analyses of a large number of patients have provided a molecular basis for RCC,reiterating the critical role of the PI3K/AKT pathway in this cancer.In this review,we summarize the genetic alterations of the PI3K/AKT pathway in RCC as indicated in the latest large-scale genome sequencing data,as well as treatments for RCC that target the aberrant activated PI3K/AKT pathway.
目的:探讨巨噬细胞活化过程中P i m-1的动态表达及抑制磷脂酰肌醇3-激酶(phosphatidylinositol 3-kinase,PI3K),P38丝裂原活化蛋白激酶(P38 mitogen-activated protein kinase,P38MAPK),Janus家族酪氨酸激酶2(Janus kinase 2,JAK2),细胞外信号调节激酶(extracellular regulated protein kinase 1/2,ERK1/2)信号关键分子后Pim-1的表达情况.方法:利用q-RT PCR、Western blot技术检测经脂多糖(lipopolysaccharides,LPS)处理后0、1、2、4、8、12、24 h巨噬细胞中P i m-1m R N A及蛋白的动态表达及P I3K、P38MAPK、JAK2及MEK1/2抑制剂对Pim-1蛋白表达的影响.

01、P<0.01、P<0.01、P
目的：观察针刺督脉大椎、百会、人中(穴)对大鼠缺血区脑组织抗损伤与保护作用。观察缺血时脑组织TNF-α和Caspase-3表达的影响,探讨针剌督脉大椎、百会、人中(穴)对脑组织产生的保护作用及产生这种保护作用的可能机制。 方法：SD雄性大鼠32只随机分为模型组、假手术组、对照点组和针刺组四组,每组各8只。建立MCAO大鼠模型,等MCAO大鼠模型生命体征稳定后,采用ZeaLonga评分法神经功能缺损评分以验证模型成功与否,造模成功者六次治疗后再行神经功能缺损评分,采用HE染色观察大鼠脑组织的病理变化、原味末端标记法(TUNEL)法检测神经细胞凋亡,并应用SP免疫组织化学方法检测大鼠脑缺血区大脑组织中的TNF-α和caspase-3的表达。

结果：1.神经功能评分：①与假手术组比较,模型组、对照点组、穴位组神经功能缺损评分明显增高,差异具有非常显著性意义(P<0.01)；②与模型组比较,对照组及穴位组神经功能缺损评分降低,穴位组差异有非常显著性意义(P<0.01),对照点组比较差异有显著性意义(P<0.05)；③与对照点组比较,穴位组神经功能缺损评分明显降低,差异有显著性意义(P<0.01)；②与模型组比较,对照点组穴位组TNF-α阳性细胞数降低,差异有显著性意义(P<0.05),穴位组TNF-α阳性细胞数降低,差异有非常显著性意义(P<0.01)；③与对照点组比较,穴位组TNF-α阳性细胞数降低,差异有显著性意义(P<0.01)；②与模型组比较,穴位组的Caspase-3阳性细胞数降低,差异有非常显著性意义(P0.05)；③与对照点组比较,穴位组Caspase-3阳性细胞数明显降低,差异有非常显著性意义(P
目的：采用抗体蛋白芯片技术观察针刺督脉经(穴)对缺血损伤脑组织修复过程中相关信号蛋白磷酸化的变化,找出与上述过程关系最为密切的信号分子及通路,采用免疫印迹(Western-Blotting)法对该通路中关键蛋白的磷酸化水平进行检测,探讨针刺督脉经(穴)对脑组织缺血性损伤可能的修复机制。

selleck screening library 方法：32只SD大鼠随机抽取8只作为假手术组,其他24只采用线栓法制备大脑中动脉阻塞(MCAO)大鼠模型后,随机分为3组,即模型组、针刺对照点组、针刺穴位组,8只／组。本研究分为三个部分,第一部分：6次治疗后先行神经功能缺损评分再处死,对大鼠部分脑组织采用HE染色行脑组织细胞形态学观察。第二部分：提取缺血脑组织细胞,采用720磷酸化抗体蛋白芯片技术检测针刺治疗后的脑组织损伤修复相关信号蛋白磷酸化的变化,筛选出各组差异性表达的蛋白。第三部分：应用Western-Blotting方法检测大鼠缺血脑组织细胞磷酸化的丝裂原活化的蛋白激酶激酶的激酶(MAPKKK即Raf)蛋白(p-Rafl)和磷酸化细胞外信号调节激酶(extracellular {Selleck Anti-infection Compound Library|Selleck Antiinfection Compound Library|Selleck Anti-infection Compound Library|Selleck Antiinfection Compound Library|selleck Anti-infection Compound Library|selleck Antiinfection Compound Library|selleck Anti-infection Compound Library|selleck Antiinfection Compound Library|Anti-infection Compound Library|Antiinfection Compound Library|Anti-infection Compound Library|Antiinfection Compound Library|Anti-infection Compound Library|Antiinfection Compound Library|Anti-infection Compound Library|Antiinfection Compound Library|Anti-infection Compound Library|Antiinfection Compound Library|Anti-infection Compound Library|Antiinfection Compound Library|Anti-infection Compound Library|Antiinfection Compound Library|Anti-infection Compound Library|Antiinfection Compound Library|Anti-infection Compound Library|Antiinfection Compound Library|buy Anti-infection Compound Library|Anti-infection Compound Library半抑制浓度|Anti-infection Compound Library价格|Anti-infection Compound Library花费|Anti-infection Compound Library溶解度|Anti-infection Compound Library购买|Anti-infection Compound Library制造商|Anti-infection Compound Library查找购买|Anti-infection Compound Library订单|Anti-infection Compound Library mouse|Anti-infection Compound Library chemical structure|Anti-infection Compound Library分子量|Anti-infection Compound Library molecular weight|Anti-infection Compound Library数据表|Anti-infection Compound Library supplier|Anti-infection Compound Library体外|Anti-infection Compound Library细胞系|Anti-infection Compound Library concentration|Anti-infection Compound Library nmr|Anti-infection Compound Library体内|Anti-infection Compound Library clinical trial|Anti-infection Compound Library cell assay|Anti-infection Compound Library screening|Anti-infection Compound Library high throughput|buy Antiinfection Compound Library|Antiinfection Compound Library半抑制浓度|Antiinfection Compound Library价格|Antiinfection Compound Library花费|Antiinfection Compound Library溶解度|Antiinfection Compound Library购买|Antiinfection Compound Library制造商|Antiinfection Compound Library查找购买|Antiinfection Compound Library订单|Antiinfection Compound Library chemical structure|Antiinfection Compound Library数据表|Antiinfection Compound Library supplier|Antiinfection Compound Library体外|Antiinfection Compound Library细胞系|Antiinfection Compound Library concentration|Antiinfection Compound Library clinical trial|Antiinfection Compound Library cell assay|Antiinfection Compound Library screening|Antiinfection Compound Library high throughput|Anti-infection Compound high throughput screening| signal-regulated kinase, ERK)蛋白(p-ERK)的表达。 结果： 1.针刺穴位可明显降低MCAO大鼠神经功能缺损评分、改善缺血损伤脑组织形态：模型组、针刺对照点组、针刺穴位组神经功能缺损评分明显高于假手术组(P<0.01),且三组的神经细胞及脑组织结构较假手术组均有不同程度的结构破坏、变性坏死；针刺对照点组神经功能缺损评分低于模型组(P<0.05),且神经细胞的结构破坏、脑组织的变性坏死较模型组减少；而针刺穴位评分明显低于模型组(P<0.01)且低于针刺对照点组(P0.05)；与模型组比较：针刺对照点组的p-Rafl含量增高,而针刺穴位组的p-Rafl含量降低,均无统计学差异(P>0.05)；与针刺对照点组比较：针刺穴位组的p-Rafl含量降低,且低于假手术组和模型组,但无统计学差异(P>0.05)。

www.selleckchem.cn/products/VX-809.html 4.与假手术组比较：模型组和针刺对照点组的p-ERK含量有升高的趋势,针刺穴位组p-ERK含量有降低的趋势,但均无统计学差异(P>0.05)；与模型组比较：针刺对照点组和针刺穴位组的p-ERK都低于模型组,均无统计学差异(P>0.05)；与针刺对照点组比较：针刺穴位组的p-ERK含量低于针刺对照点组,且低于假手术组和模型组,但无统计学差异(P>0.05)。 结论： 1.针刺大椎、百会、人中(穴)能明显改善MCAO大鼠的神经功能缺损和缺血损伤脑组织形态。提示针刺大椎、百会、人中(穴)对缺血损伤脑组织具有一定的保护作用。 2.针刺大椎、百会、人中(穴)可调整造模后失调的与凋亡有关蛋白的磷酸化水平,此外,还可调整多个其它功能种类的蛋白,且涉及到的信号转导通路归属于细胞周期信号转导通路、MAPKS信号途径、细胞凋亡信号途径、黏附分子信号途径、非受体酪氨酸激酶信号途径、受体酪氨酸激酶信号途径等多条信号转导通路。提示多靶点、多条信号转导通路的激活是针刺大椎、百会、人中(穴)促缺血损伤脑组织修复的重要特征。 3.各通路中只有MAPKS信号传导途径中的关键蛋白被激活,提示MAPKS信号转导通路与针刺大椎、百会、人中(穴)对缺血损伤脑组织修复密切相关。 4.

5% to meet the requirement of condi-tions for the development and research of thiofuran AG-014699化学结构 siamese as a new medicine of anticarcinogen.Contrasted with the traditional technique,this process featured with cheap raw materials,possible for solvent recovery and reuse,low comprehensive cost,and suit-able for production on certain scale.
本文通过文献检索和归纳总结,介绍了抗癌靶点分子PI3K及靶向药物PI3K抑制剂的研究进展。PI3K在肿瘤发生中起着关键性作用,因此PI3K抑制剂已成为当前抗癌新药开发的热点。迄今为止,已有包括ZSTK474在内的近20种新型PI3K抑制剂因具有较好的抗肿瘤效果和较低的毒性而被批准进入临床试验。PI3K抑制剂与其他药物的联合治疗试验也已取得较好效果。PI3K抑制剂有望在不远的将来成为一类新型分子靶向药物。
目的:总结PI3K/Akt/mTOR信号通路靶向治疗在乳腺癌中的研究进展。方法:以”PI3K/Akt/mTOR、信号通路和乳腺癌”等为关键词,检索2000-01-2011-06PubMed、Ovid和Springer等数据库的相关文献。纳入标准:1)关于PI3K/Akt/mTOR信号通路的组成、功能特点;2)PI3K/Akt/mTOR信号通路与乳腺癌的关系研究;3)以PI3K/Akt/mTOR信号通路中关键分子为靶点的乳腺癌治疗。根据纳入标准,符合分析的文献40篇。结果:信号转导通路的异常是肿瘤发生、发展的重要步骤,PI3K/Akt/mTOR信号通路与人类多种肿瘤密切相关,其在肿瘤细胞的增殖、存活、抵抗凋亡、血管发生和转移以及对放化疗抵抗中发挥了重要作用。乳腺癌中常见PI3K/Akt/mTOR信号通路的异常激活,以此通路为靶点的药物已成为乳腺癌治疗的研究热点。结论:靶向PI3K/Akt/mTOR通路中关键分子的众多药物在乳腺癌开展了一系列相关的临床试验研究,一部分显示出较好的安全性和有效性。随着对PI3K/Akt/mTOR通路的分子生物学机制的深入研究,期待靶向此通路的抑制剂将会在乳腺癌治疗中发挥巨大的作用,进一步提高乳腺癌患者的疗效和改善预后。
乳腺癌是我国最常见的恶性肿瘤,其发病率以每年3%～4%的速度递增,目前,我国每年的乳腺癌发病人数已经有20万左右,严重危害人类的健康。目前研究发现磷脂酰肌醇3激酶-蛋白激酶B(PI3K-Akt)通路在人类肿瘤谱中存在普遍的失调现象,该通路某些成分突变可导致通路功能改变,
磷脂酰肌醇3-激酶/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(phosphoinosmde-3-kinase/the

mammalian target of rapamycin,PI3K/mTOR)双重抑制剂已经成为抗肿瘤药物研发的热点之一。本文介绍芳基脲类和3-吡啶基杂环类等PI3K/mTOR双重抑制剂的化学结构,根据其结构特点及其与PI3Kγ共结晶模式,剖析了两类抑制剂药效团的基本结构。
针对性的使用细胞毒性药物是常用的抗癌方法,但该方法不能区分正常的细胞增殖和肿瘤细胞。PI3K依赖性信号转导通路可调节细胞的分裂、分化、凋亡等活动,但特定位点的基因遗传变异会导致PI3K依赖性信号通路过度表达,造成肿瘤细胞的发生和持续发展。使用PI3K信号通路的分子抑制剂被认为是针对癌症治疗的一个最有前途的方案。本文对PI3K抑制剂的临床开发和应用进行介绍,并对最新的研究进展和发展前景进行讨论。
研究表明大约有20%的乳腺癌患者存在HER2过表达现象。HER2的异常表达及异常信号通路与乳腺癌的侵袭转移、治疗抵抗及不良预后密切相关。在临床上,对于HER2阳性的初期乳腺癌患者常联合曲妥珠单抗及化学药物治疗,但部分患者对曲妥珠单抗产生耐药。因此,研究其耐药机制对于HER2阳性乳腺癌患者的治疗、预后及新疗法的探索具有重要的临床意义。目前引起曲妥珠单抗抵抗的主要机制有:p95-HER2累积、PI3K/AKT/mTOR信号异常激活、HER家族受体和IGF-1R信号增加、非受体酪氨酸激酶c-SRC活性增加等。将对上述机制及治疗HER2阳性乳腺癌的新疗法进行综述。
A

GSK1120212临床试验 series of 2,6-disubstituted-4-morpholinothieno[3,2-d]pyrimidine 一般 derivatives were synthesized and their cytotoxic activity against H460,HT-29,MDA-MB-231,U87MG and H1975 cancer cell lines were evaluated in vitro.Most of the target compounds exhibited moderate to excellent activity to the tested cell lines.The most promising compound 23(0.84μmol/L,0.23μmol/L, 2.52μmol/L,1.80μmol/L) was 1.0,2.9,29.3 and 4.3 times more active than GDC-0941(0.87μmol/L,0.66μmol/L,73.8μmol/L, 7.77μmol/L) against H460,HT-29,MDA-MB-231 and U87MG cell lines,respectively.
KRAS基因突变作为表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)单抗疗效预测指标的发现,给转移性结直肠癌(metastatic colorectal cancer,mCRC)的治疗带来了巨大的改变.然而,结直肠癌(colorectal cancer,CRC)的发生涉及到多个癌基因、抑癌基因和信号传导通路的改变,而不同的信号传导通路之间存在着千丝万缕的联系,形成了复杂的信号传导网络.如何寻找使用抗EGFR单抗的适合人群,从而避免不必要的不良反应和无效治疗是目前研究的热点.本文就目前国内外研究较多的预测抗EGFR单抗疗效的生物靶标及相应对策进行综述.

角膜缝线法建立SD大鼠角膜新生血管模型建立大鼠右眼新生血管模型,在大鼠角膜缘内1mm等间距缝合3针,深及基质层。选取未缝线的正常角膜作为阴性对照组,并将缝线后大鼠随机分为缝线后第1日组,第3日组以及第7日组,每组8只。

2.显微镜下观察角膜缝线后每日在手术显微镜下观察,均放大16倍,注意角膜透明度、上皮完整性、缝线数量以及是否存在角膜感染。 购买GW-572016 3.计算角膜新生血管面积计算角膜缝线后第1日、第3日以及第7日,分别在显微镜下测量角膜新生血管长度,并依据Robert公式计算角膜新生血管面积。 4. Western Blot检测缝线后角膜血管化进程中p38和磷酸化p38的表达缝线当日以及缝线后第1、3、7日,分别从各组随机选取5只大鼠,摘取角膜,收集角膜蛋白,采用Western Blot方法检测各组角膜p38以及磷酸化p38的表达,并检测目的蛋白IOD与内参GAPDH的IOD,二者比值作为目的蛋白的相对表达量。 5.免疫荧光检测p38和磷酸化p38在角膜上的表达按照分组分别在特定时间摘取角膜,采用免疫荧光的方法检测p38和磷酸化p38在角膜的表达以及定位。 6.统计学分析采用SPSS13.0软件分析,计量资料以均数±标准差表示。当方差齐性时,采用one-way ANOVA分析；方差不齐时采用Welch法校正。组间比较,当方差齐性时,采用LSD分析；当方差不齐性时,采用Dunnett T3进行分析。所有统计推断均采用双侧检验,检验水准α=0.05。 结果 1.显微镜下观察缝线后7d,角膜缘血管网充血,缝线处角膜水肿增厚,并随时间延长逐渐加重,缝线后3d,睫状充血明显,角膜缝线处角膜缘明显局限性充血,可见新生血管缓慢长入,每处约2-5支,缝线处角膜未见明显混浊,全角膜透明；缝线后7d,见大量新生血管长入透明角膜,新生血管呈密集网状,无法计数,部分新生血管长到缝线处,缝线处角膜轻度混浊并增厚。

2.角膜新生血管面积缝线后第1日,未发现新生血管；缝线后3、7d,角膜新生血管面积分别为4.1-1.22、7.26±0.72mm2；而正常角膜无新生血管。 因为 3.Western Blot结果 各组角膜p38的相对表达量为：正常角膜组0.5681±0.1074,缝线后第1日组为0.5512±0.0795,第3日组为0.5517±0.0908,第7日组为0.5641±0.1168；不同实验组间p38的表达量无显著性差异(F=0.037,P=0.990)。 各组角膜磷酸化p38的相对表达量为：正常角膜组0.2969±0.0475,缝线后第1日组0.6219±0.0609,第3日组0.2812±0.0602,第7日组为0.3149±0.0496；不同组之间磷酸化p38相对表达量有显著性差异(F=43.895,P=0.000)；以缝线后第1日最高,缝线后第3、7日次之；而正常角膜与缝线后第3、7日无显著性差异。 4.免疫荧光结果各组p38表达基本一致,主要分布在炎性浸润细胞,新生血管内皮细胞以及部分上皮细胞,主要定位于细胞浆；而磷酸化p38表达在炎性细胞、新生血管内皮细胞,主要定位于细胞核,在缝线后第1日高表达。

BI 2536制造商 结论 1.在大鼠角膜血管化进程中,p38表达基本恒定；而磷酸化p38在缝线后第1日,即出现高峰表达,而后迅速衰减,至缝线后第3、7日已基本恢复至正常。 2.大鼠角膜缝线后,早期即有p38信号通路的强激活,而后逐渐出现可观察到的角膜新生血管。 3.缝线后大鼠角膜新生血管化可能与p38信号传导通路激活相关。 4.p38信号传导通路的早期激活可能是缝线后角膜新生血管生长的始动因素之一。 第二部分结膜下注射50μmol/L p38信号传导通路抑制剂SB203580对大鼠角膜的毒性作用 目的 研究结膜下注射SB203580对大鼠角膜的毒性作用,探索结膜下注射SB203580的合适浓度,探讨结膜下注射SB203580用于阻断p38信号传导通路的可能性,为后续实验奠定基础。 方法 1.配置50μmol/L SB203580溶液取0.05mL预冷的二甲基亚砜加入1mgSB203580中,振荡,然后加入预冷的生理盐水53.00mL,充分振荡混匀。按每支1mL分装于无菌冻存管中,-20℃冻存备用。 2.实验分组SD大鼠适应性饲养1周,裂隙灯显微镜检查排除大鼠结膜、角膜疾病后,随机分为50μmol/L SB203580组和生理盐水组,每组10只。 3.结膜下注射均选右眼进行实验,在角膜缘外0.5～1.0mm,沿顺时针方向,在12,2,4,6,8,10,12点位注射,依次每日选取1个注射点,每日1次行结膜下注射,共7d。按照实验分组分别注射50μmol/L SB203580和生理盐水0.04mL。 4.实验观察以及角膜炎症指数评分在裂隙灯显微镜下观察注射点结膜充血情况、角膜透明情况以及上皮是否完整等。结膜下注射7d后,在裂隙灯下观察中央角膜水肿程度、周边角膜水肿程度以及睫状充血程度行角膜炎症指数评分。 5.组织学及透射电镜观察结膜下注射7d后,摘取角膜,沿中心线剖切一分为二。一半用40g/L多聚甲醛固定,常规制作石蜡切片,苏木精-伊红染色观察组织学改变；另一半迅速用预冷的25g/L戊二醛固定,常规丙酮梯度脱水、渗透、包埋,超薄切片,醋酸铀及柠檬酸铅双重染色,透射电镜观察。 6.统计学分析采用SPSS13.0软件分析,计量资料以均数±标准差表示,组间比较采用T检验,所有统计推断均采用双侧检验,检验水准a=0.05。 结果 1.动物观察裂隙灯显微镜下观察发现SB203580注射部位结膜呈可逆性贫血状改变,注射次日即消失；在注射过程中,连续观察见角膜始终透明,上皮层无水肿、无剥脱。 2.在连续结膜下注射SB203580或生理盐水7d后,两组大鼠角膜炎症指数分别为：0.14±0.07,0.21±0.10,两组间炎症指数无显著性差异(t=1.716,P=0.103)；其中两组睫状充血程度评分分别为：0.70±0.48和1.30±0.67,生理盐水组睫状充血程度评分显著高于SB203580组(t=2.286,P=0.035)。 3.

17，与LIP+BI组相比，HG明显升高（P＜0.01），ND值明显降低（P＜0.01）。上述结果表明，肢体缺血预处理明显减轻了大鼠全脑缺血再灌注引起的海马CA1区迟发性神经元死亡、发挥了脑保护作用，而分别或联合切断双侧股神经和坐骨神经均可以部分阻断LIP的上述脑保护作用，提示神经途径参与了LIP诱导的脑缺血耐受。

TUNEL染色结果显示，脑缺血的sham组海马CA1区偶有棕黄色深染的TUNEL阳性细胞，神经元体积变小，核固缩，呈圆点状或扇形，染色质呈新月形或条形聚集于核周。脑缺血组海马CA1区可见大量的TUNEL阳性细胞，与sham组相比细胞数目明显增加（P＜0.01），提示8min的全脑缺血对大鼠海马CA1区锥体细胞的打击是致命的，引起大量的神经元细胞凋亡。LIP+BI组TUNEL阳性神经元数与脑缺血组相比明显减少（P＜0.01），说明LIP明显抑制全脑缺血引起的海马CA1区锥体细胞凋亡，诱导了脑缺血耐受。与LIP+BI组相比，FNS+LIP+BI组、SNS+LIP+BI组和FNS+SNS+LIP+BI组，海马CA1区TUNEL阳性细胞数明显增加，表明分别或联合切断双侧股神经和坐骨神经可拮抗LIP抑制凋亡的作用。 因为 2股神经和或坐骨神经在肢体缺血预处理上调海马CA1区p38MAPK表达中的作用 90只Wistar大鼠永久凝闭双侧椎动脉恢复两天后，随机分为以下9组：①全脑缺血的sham组（n=10）：只暴露双侧颈总动脉，不阻断血流；②全脑缺血组（brain ischemia, BI）（n=10）：夹闭双侧颈总动脉8min后恢复再灌注；③LIP+BI组（n=10）：夹闭双侧股动脉10min、再灌注10min、反复3次作为肢体缺血预处理后，即刻夹闭双侧颈总动脉8min作为损伤性缺血，然后恢复再灌注；④股神经切断（femoral nerve resection, FNS）+全脑缺血组（n=10）：切断双侧股神经，即刻给予8min全脑缺血；⑤股神经切断+LIP+全脑缺血（FNS+LIP+BI）组（n=10）：LIP前切断双侧股神经，即刻给予8min全脑缺血。⑥坐骨神经切断（sciatic nerve resection,SNS）+全脑缺血组（n=10）：切断双侧坐骨神经，即刻给予8min全脑缺血；⑦坐骨神经切断+LIP+全脑缺血（SNS+LIP+BI）组（n=10）：LIP前切断双侧坐骨神经，即刻给予8min全脑缺血；⑧股神经切断+坐骨神经切断+全脑缺血（FNS+SNS+BI）组（n=10）：切断双侧股神经及双侧坐骨神经，即刻给予8min全脑缺血；⑨股神经切断+坐骨神经切断+LIP+全脑缺血（FNS+SNS+LIP+BI）组（n=10）：LIP前切断双侧股神经及双侧坐骨神经，即刻给予8min全脑缺血。以上各组大鼠在sham手术或末次缺血再灌注12h断头取脑，各组分别取5只用于免疫组织化学、5只用于Western

EX527 blotting，检测大鼠海马CA1区p-p38MAPK的表达。 免疫组化结果显示，全脑缺血的sham组和全脑缺血组海马CA1区p-p38MAPK阳性表达较少，阳性细胞胞核着色，呈棕黄色，染色浅，积分光密度分别为3.37±0.12、3.30±0.03，阳性细胞总面积分别为6056.23±522.3、6106.62±458.43（μm2,下同）。LIP+BI组海马CA1区神经元p-p38MAPK的表达明显增多，胞核着色加深，呈深棕黄色，其积分光密度和阳性细胞总面积分别为11.90±0.27和12036.60±693.91，与BI组相比有显著的统计学意义（P<0.01），表明LIP能够上调脑缺血大鼠海马CA1区p-p38MAPK的表达。与LIP+BI组相比，FNS+LIP+BI组海马CA1区神经元中p-p38MAPK的表达量较少，胞核染色较浅，有显著统计学差异（P<0.01），其积分光密度和阳性细胞总面积分别为4.63±0.07和6561.17±301.5。SNS+LIP+BI组海马CA1区神经元中p-p38MAPK的表达量降低，与LIP+BI组相比，阳性细胞积分光密度（5.07±0.13）和阳性细胞总面积（6835.91±401.47）均有明显统计学差异（P<0.01）。FNS+SNS+LIP+BI组海马CA1区神经元中p-p38MAPK的表达量少，胞核着色浅，阳性细胞积分光密度和总面积分别为3.15±0.22和6361.81±210.41，与LIP+BI组相比有明显统计学差异（P<0.01）。FNS+LIP+BI组、SNS+LIP+BI组和FNS+SNS+LIP+BI组中p-p38MAPK的表达量较少，与LIP+BI组相比有统计学差异（P
目的： Alisertib体内 探讨硫酸镁对人脐静脉血管内皮细胞（HUVEC）细胞经60Co γ射线照射后细胞增殖、周期、凋亡的影响，并分析其可能的机制。同时观察硫酸镁对胶质瘤U251细胞照射后细胞周期、凋亡的影响。研究结果为硫酸镁的临床应用提供实验依据和支撑。 方法： 1、取对数生长期的HUVEC细胞，采用CCK-8法检测硫酸镁对细胞存活率及增殖的影响，筛选合适浓度的硫酸镁。用流式细胞仪检测细胞周期分布和AnnexinV/PI双染色法检测细胞凋亡情况。 2、用NO试剂盒和SOD试剂盒分别测定NO含量和SOD活性，硫代巴比妥酸法（thiobarbituric acid,TBA）测定丙二醛（malondialdehyde,MDA）含量变化。 3、Real-Time PCR方法检测ICAM-1mRNA、NF-κB mRNA表达。 4、不同浓度的硫酸镁预处理对数生长期的脑胶质瘤U251细胞，经γ射线照射后不同时间点收集细胞，采用流式细胞仪检测细胞周期、细胞凋亡率的变化。 5、数据分析采用SAS8.

01),二者在胃癌组织中的表达均与胃癌的分化程度、TNM分期、浸润深度、淋巴结转移情况相关(P
The current standard treatment

option for advanced hepatocellular carcinoma(HCC) is sorafenib, but its clinical benefit is modest. In spite of many attempts, few drugs can provide any significant AZD8055 improvement of survival as the first- or second-line therapy of choice in phase Ⅲ randomized controlled trials. Recently, the subgroup analysis of a phase Ⅱ randomized controlled trial has shown that tivantinib, a selective MET inhibitor, can significantly improve the overall survival in patients with MET-positive 查找更多 advanced HCC after the failure or intolerance of a prior systemic therapy. These findings enlighten the role of MET inhibitors in the treatment of advanced HCC. In this paper, we review all ongoing and completed clinical trials regarding this topic. As for the first-line therapy of advanced HCC, INC280 and foretinib are being evaluated in 2 phase Ⅱ single-arm trials; and MSC2156119 J and golvatinib plus sorafenib are being compared with sorafenib alone in 2 phase Ⅱ randomized controlled trials.

As for the second-line therapy of advanced HCC, tivantinib and cabozantinib are being compared with placebo in 2 phase Ⅲrandomized controlled trials.
The incidence of gastric cancer(GC) fell dramatically over the last 50 years, but according to IARC-Globocan 2008, it is the third most frequent cause of cancerrelated deaths with a case fatality GC ratio higher than other common

malignancies. Surgical resection is the primary curative treatment for GC though the overall 5-year survival rate remains poor(approximately 20%-25%). To improve the outcome of resectable gastric cancer, different treatment strategies have been evaluated such as adjuvant or perioperative chemotherapy. In resected 什么 gastric cancer, the addition of radiotherapy to chemotherapy does not appear to provide any additional benefit. Moreover, in metastatic patients, chemotherapy is the mainstay of palliative therapy with a median overall survival of 8-10 mo and objective response rates of merely 20%-40%. Therefore, the potential for making key beneficial progress is to investigate the GC molecular biology to realize innovative therapeutic strategies, such as specific immunotherapy.