4、为探讨Ezrin影响U251和U87细胞迁移、浸润性生长的机制，RT-PCR和Western blot分析shRNA-Ezrin-2与过表达载体pEGFP-C1/Ezrin转染细胞的Rac1的表达，结果显示，pEGFP-C1/Ezrin转染组很少Rac1表达量高于shRNA-Ezrin-2转染组和对照组，而shRNA-Ezrin-2转染组低于对照组。表明Ezrin可激活Rac1，Ezrin对U251和U87细胞的影响是通过Rac1实现的。 5、Transwell所以发现U87细胞的迁移能力强于U251细胞，为分析这种差异的原因，对Ezrin结构进行了分析，结果显示，U87细胞的Ezrin蛋白在第66、258、265和577位发生变异，而C端的34氨基酸是Ezrin与F-actin结还有合的位点，N端的296个氨基酸是与C端107个氨基酸残基相联系的功能域[22]，在此区域内发生氨基酸变异，是否影响Ezrin与F-actin或细胞膜的结合而影响其功能，从而影响细胞的迁移。本研究对具有不同浸润能力的脑胶质瘤细胞U251和U87的Ezrin蛋白功能和结构通过生物信息学方法加以分析、说明。

大量证据表明，HSP27可以作用于凋亡通路上的多个环节，抑制细胞凋亡，使损伤刺激下的细胞存活率显著提高，它在不同信号通路中所起的作用与细胞内的其他凋亡信号分子组成了一个复杂的调节网络。本部分的研究目的就是探讨在人类肝细胞肝癌细胞系中HSP27与细胞凋亡的关系，并进一步分析其参与肝癌细胞凋亡的分子机制及其与肝癌侵袭转移的内在联系。 应用RNA干扰技术，抑制高转移潜能人肝癌细胞系MHCC97H的Lonafarnib分子量HSP27的表达。瞬时转染化学合成的双链HSP27小干扰RNA(siRNA，100nM)后，检测到MHCC97H细胞中HSP27的mRNA和蛋白表达均受到明显抑制。以MHCC97H细胞作为试验的细胞模型，设置对照组(MHCC97H细胞)、MOCK组(转染非特异性的阴性对照dsRNA)、RNAi组(转染HSP27 siRNA)3个试验平行组，应用流式细胞仪分析(JC-点击此处1标记)和脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL)，观察HSP27对MHCC97H细胞凋亡比例的影响。应用流式细胞仪分析显示，与MOCK组相比，RNAi组中MHCC97H细胞凋亡比例增加了20.07％，HSP27 RNA干扰后MHCC97H细胞凋亡比例明显增加。TUNEL法标记细胞核也显示HSP27 RNA干扰后MHCC97H细胞凋亡比例增加。 取此网站对照组、MOCK组和RNAi组细胞进行人类信号转导通路发现者基因芯片的检测，结果显示RNAi组中IL2(0.12±0.019)、LTA(0.38±0.029)、NFKB1(NF.B 0.03±0.027)、NFKBIA(I.B. 0.27±0.033)、PECAM1(0.43±0.026)均出现明显下调，并经实时定量PCR证实。通过pathway miner软件分析，这些基因均位于NF-.B通路，提示HSP27与细胞内NF-.B通路的激活相关。

Aurora激酶是近年来发现的新型抗肿瘤靶点,它在肿瘤的发生发展中起到至关重要的作用。该文从Aurora激酶作为抗肿瘤靶点的意义,Aurora-A激酶特异性抑制药及临床应用,Aurora-B激酶特异性抑制药及临床应用,Pan-Aurora激酶查找更多特异性抑制药及临床应用等几个方面,对Aurora激酶抑制药的研究进展进行论述,期望能够对临床工作者有所帮助。
95%的慢性粒细胞白血病(chronic myeloid leukemia,CML)患者存在t(9;22)(mTOR inhibitorq32;q21)易位即Ph’染色体,从而形成Bcr-Abl融合基因并编码具有高酪氨酸激酶活性的BCR-ABL融合蛋白,在慢性粒细胞白血病的发病中起着重要作用。甲磺酸伊马替尼(Imatinib mesylate,IM,格列Ibrutinib卫)是针对酪氨酸激酶的靶向抑制剂,它通过与ATP竞争结合位点使底物不能磷酸化,从而阻断下游异常的细胞信号转导通路,达到抑制肿瘤细胞增殖并诱导细胞凋亡的目的,对慢性粒细胞白血病患者有很好的治愈率。但随着药物的推广,临床上部分病人出现了对伊马替尼的耐药。本文就伊马替尼耐药机制以及耐药患者的解决方案综述如下。

结果: 1.治疗后基本情况: A组瘤兔未出现死亡,情况良好;B组死亡1只,C组1只瘤兔皮肤切口不愈,1只死亡,余瘤兔1-3天内出现不同程度的嗜睡,精神萎,拒食,恶心等现象,4-7天症状逐渐缓解。血ALT值检测情况:术后第1、4天B、C两组ALT升高明显,B、C两组各检测时间点两两相比,差异无统计学意义(pselleck好不好值大于0.05),与A组相比有统计学差异(p值小于0.01)。其中术后第1天ALT值最高,第4天呈下降趋势,第7天基本恢复至治疗前水平。血UREA值检测情况:各组间两两比较及组内各时间点比较差异无统计学意义(p值大于0.05)。 2.微血管密度检测: C组微血管密度明显低于其他两GS-7340核磁共振组,差异有统计学意义( p值
目的(1)研究不同病理级别的胶质瘤肿瘤干细胞CD133的表达及其分布规律。(2)观察不同病理级别的人脑胶质瘤的肿瘤干细胞在体外分离培养和增殖分化的情况。并探讨低级别和高级别胶质瘤的肿瘤干细胞在体外增殖和分化上的差异,以及它的特异性抗体CD133在分为什么化进程中的表达情况。为进一步探讨脑肿瘤干细胞分子调控机制打下基础。 方法采用方法:(1)对78例Ⅰ-Ⅳ脑胶质细胞瘤的病理切片进行CD133免疫荧光染色和免疫组化染色,观察和比较不同病理级别脑胶质细胞瘤肿瘤干细胞之间的分布特点。(2)通过对不同病理级别手术切除的胶质细胞瘤新鲜标本在体外无血清培养基中分离培养和体外增殖分化进行观察研究和分组比较它们的增殖能力。

每隔2~3d观察一次,并取原头蚴经伊红染色后,置于显微镜下计数并计算存活率。另取适量标本于解剖镜下观察虫体活力。结果在无胰蛋白酶条件下原头蚴平均存活率为98.52%,虫体活力最好;在1.00%胰蛋白酶条件下原头蚴平均存活率为92.47%,虫体活力Ruxolitinib制造商最差,部分虫体中颗粒外溢。结论原头蚴在不同浓度胰蛋白酶作用下,其活力有不同程度的改变,以≤0.50%的胰蛋白酶对原头蚴发育的刺激作用较强,原头蚴对0.50%~1.00%胰蛋白酶的耐受性低。
肾上腺皮质癌(AdrenocOSI744ortical carcinoma,ACC)是罕见的内分泌恶性肿瘤,预后较差。手术完全切除是目前首选治疗方法,手术方式包括开放性肾上腺切除术和腹腔镜肾上腺切除术。但由于肾上腺皮质癌早期诊断困难,多数患者发现时已是晚期,失Dolutegravir浓度去手术机会,只能采用米托坦单用或与细胞毒性药物联用的治疗方案,效果并不理想。随着对肾上腺皮质癌发生发展机制研究的不断加深,靶向治疗显现出了巨大的发展潜力,已成为目前研究的热点,现有多种针对不同靶点的药物进入了临床试验,如OSI-906、阿西替尼、索拉菲尼等。本文就目前肾上腺皮质癌的最新治疗进展予以综述。

目的：检测具有EGFR突变临床特征的非小细胞肺癌患者EML4-ALK融合基因的发生率,分析其与临床特征的关系,为今后的非小细胞肺癌个体化治疗提供参考。 材料和方法： 1、在广西医科大学附属肿瘤医院标本库中共筛选出102例自2006年1月至2011年8月期间接受手术切除的新鲜非小细胞肺癌组织标本；入组的非小细胞许多肺癌患者均为中国人,且至少满足以下一个入组条件：女性、不吸烟／少吸烟和腺癌。 2、通过参考文献,本研究选用3对不同的引物对EML4-ALK融合基因进行PCR扩增。首先采用RNA提取试剂盒对102例新鲜肿瘤组织标本进行总RNA的提取,后采用逆转录试剂盒将其逆转录成cDNA,再用单管多重逆转http://www.selleckchem.cn/products/LBH-589.html录聚合酶链反应(Multi plex RT-PCR)对cDNA进行扩增。最后将PCR产物进行琼脂糖凝胶电泳,检测EML4-ALK融合基因的突变情况,并对在电泳中出现阳性条带的PCR产物进行直接测序,后将所测序列与EML4-ALK融合基因各亚型的已知序列进行比对,最终确定有无EML4-ALwww.selleckchem.cn/products/ink128.htmlK融合基因的突变及突变类型。 3、采用DNA提取试剂盒对EML4-ALK阳性标本进行DNA提取,后采用聚合酶链反应(PCR)对DNA进行扩增,再对PCR产物进行直接测序,以检测其EGFR(18-21号外显子)及KRAS(1、2号外显子)的突变情况。 4、从年龄、性别、吸烟史、病理类型、临床分期这五个临床特征上对EML4-ALK阳性和阴性的非小细胞肺癌患者进行对比。

对早期、中期和晚期乳腺癌的手术治疗的同时辅以五味子乙素,均可以使小鼠生存时间延长。病理切片提示,五味子乙素降低了肿瘤细胞对周围肌肉组织的侵袭,使肿瘤细胞之间保持相对紧密的连接,抑制了其向间质细胞形态的转化。免疫组化的结果证明,所有这些现象的原因在于五味子乙素抑制了体内乳腺癌细胞的上皮间质转化过程。 细胞实验证明,五味子乙素抑制了TGF-β引起4T1细胞的形态变化。划痕试验证明,selleck激酶抑制剂五味子乙素可以降低肿瘤细胞的迁移能力。Transwell实验证明,五味子乙素降低了肿瘤细胞的侵袭能力。免疫荧光实验及Western蛋白电泳实验证明,五味子乙素抑制了4T1细胞的上皮间质转化过程。 综上所述,本项研究证明,五味子乙素在体内、体外均可以抑制乳腺癌细胞的上皮间质转化。五味子乙素具有较低的毒性,对正常细胞及肿瘤细胞均没有杀伤作用。目前,临床上尚Buparlisib购买无此类只作用于肿瘤转移过程的药物。本实验的结果表明,五味子乙素具有巨大的临床应用价值和开发前景。本课题的研究目的在于为五味子乙素临床应用提供理论依据和基础数据。
20(S)-原人参二醇（Protopanxadiol, PPD）是从西洋参（Panax quinquefoliumL.）茎叶总皂苷中提取、分离、转化而得到的人参二醇组皂苷元，分子式为C30HMG-132化学结构52O3，相对分子质量为460.70，具有广谱的抗肿瘤作用。本研究选用人乳腺癌MCF-7细胞作为研究对象，探讨PPD通过抑制PI3K/AKT/mTOR信号途径诱导人乳腺癌MCF-7细胞凋亡的作用机制。 本研究通过MTT法、荧光染色法、流式细胞术、蛋白免疫印迹、QPCR、细胞转染、siRNA干扰技术及免疫组化等多种方法，从形态学、蛋白及基因水平探讨PPD诱导人乳腺癌MCF-7细胞凋亡作用及体外、体内诱导MCF-7细胞凋亡的作用机制。

帕波克利最常见的不良反应为中性粒细胞减少、感染、肺栓塞等。本文对帕波克利药理作用、药动学、临床评价、安全性、用法用量和药物相互作用进行综述。
细胞周期是一个高度有序的生物系统,控制着细胞的增殖分化。其中细Dinaciclib胞周期蛋白(cyclins),细胞周期蛋白依赖性激酶(CDKs)对于细胞周期的正常进行至关重要。细胞周期调节蛋白的异常导致细胞周期紊乱,造成细胞无限增殖。这是导致胃肠道癌发生的重要3-MA分子重量原因。目前,许多的细胞周期抑制剂类药物处于临床研究阶段。文章综述了胃肠道癌症的发病机理,阐述了现有临床研究的细胞周期靶向抑制剂现状。
乳腺癌属于激素依赖性肿瘤,其内分泌治疗机制是时间改变激素依赖性肿瘤生长所需要的内分泌微环境,使癌细胞增殖停止于G_O/G_1期,从而达到防控肿瘤和促其缓解的目的。晚期转移性乳腺癌患者由于机体抵抗力弱或者合并其他禁忌证,对二次手术或化疗一般不能耐受;而内分泌治疗由于不良反应小,临床获益率高等优点易于被患者所接受。

Aurora-A是Aurora激酶家族中的重要成员之一,在细胞有丝分裂过程中发挥着重要功能,Aurora-A的过度表达与人类多种恶性肿瘤紧密相关。鉴于Aurora-A的重要作用,其被作为一个设计抗肿瘤药物的新靶点。目前已有几种选择性Aurora-A激酶抑制剂进入到临床研究中,并且selleck抑制剂表现出良好的治疗效果。本文从Aurora-A激酶的生物学、与肿瘤的密切关系及其抑制剂的研发状况进行综述。
BCR-ABL是一种由bcr基因和c-abl原癌基因融合产生的致癌基因。该基因表达的Bcr–Abl癌蛋白是慢性粒细胞白血病的病理学基础。因此研发选择性和的Bcr–Abl酪氨酸激酶抑制剂成为治疗慢性粒细胞白血病的一种有效策略。目前已有数个Bcr–Abl酪氨酸激酶抑制剂获准上市。然而,Abl激酶结构域的突变或其他原因导致肿瘤耐药性的出现,其中T315I突变是最重要的突变之一,引发的耐药性更是难以克服。重点介绍了Selleck Talazoparib针对T315I突变的Bcr–Abl酪氨酸激酶抑制剂的研究进展。
目的从结构出发介绍Aurora激酶及其抑制剂的研究进展。方法总结Aurora激酶抑制剂骨架特征和结合模式,以及进入临床的Aurora激酶抑制剂的研究进展。结果和结论 Aurora激酶家族是肿瘤治疗的一个新兴靶标。腺嘌呤骨架可能是设计高活性Aurora激酶抑制剂的重要母核。

33±0.07)%及(51.67±0.04)%。三组细胞相比,F=3.055,P=0.12,无明显统计学差异。显微镜下计数每个克隆的细胞数,未转染、转染空质粒及转染IL-24真核表达载体的SKOV3细胞,每个克隆的细胞数分别为303±15.67、295±13.54及99±11.97,三组细胞相比,F=699.868,P=0.000,有统计学意义。经SNK-q法两两分析,转染空载体组与未转染组细胞每个克隆细胞数无显著统计学差异(P=0.326),两者与IL-24转染组细胞之间每个克隆细胞数有显著性差异(P=0.000)。表明IL-24可抑制SKOV3细胞的增殖。

7、倒置显微镜下观察细胞形态学改变,可见死亡细胞明显增多。Hoechest 33258荧光染色观察IL-24转染后细胞核的变化,可见未转染组及转染空载体组细胞发出较微弱的蓝色荧光,细胞核大小基本一致,为圆形或椭圆形,被染成均匀的淡蓝色,无明显的形态学改变,极少见到凋亡细胞和凋亡小体。IL-24转染组可见较多凋亡细胞,发出较强的蓝色荧光,细胞浆密度增大、颜色变深,细胞核体积变小,形态不规则,大小不一,见呈碎块状致密浓染,形状不规则的染色质,核膜呈境界分明的块状或新月形小体,有凋亡小体形成及核裂解。 8、流式细胞仪检测IL-24转染后细胞周期变化,未转染、转染空载体及转染IL-24真核表达载体后的SKOV3细胞,G2/M期平均分别为4.29%、4.79%和12.88%。转染IL-24后的SKOV3细胞与未转染及转染空载体的细胞相比,G2/M期细胞比例明显增加,有统计学意义(F=309.805,P=0.000)。两两分析表明,未转染、空载体转染与IL-24真核表达载体转染的SKOV3细胞之间,G2/M期的细胞数有显著差异(P=0.000)。未转染与转染空质粒的SKOV3细胞相比,G2/M期细胞比例无明显变化,无统计学意义(P=0.233)。 BI 6727订单 9、流式细胞仪检测IL-24转染后细胞凋亡率变化,未转染、转染空载体及转染IL-24真核表达载体后的SKOV3细胞,细胞凋亡率平均分别为3.33%,3.60%,14.51%,差异具有统计学意义(F=1205.073,P=0.000)。两两分析表明,未转染、空载体转染与IL-24转染的SKOV3细胞之间,细胞凋亡率有显著性差异(P=0.000)。未转染与空载体转染组之间,细胞凋亡率无显著性差异(P=0.318)。

10、用RT-PCR法检测SKOV3细胞转染IL-24、转染空载体与未转染组细胞中p53 mRNA表达的变化,实验组和对照组均在600~+bp左右处扩增出p53 mRNA特异性条带,在550bp左右处扩增出β-actinmRNA特异性条带,SKOV3未转染组、空载体转染组和IL-24转染组p53 mRNA相对表达量分别为0.43±0.005、0.44±0.004和0.44±0.005。实验组及对照组上皮性卵巢癌SKOV3细胞中p53 selleck化学药品 mRNA相对表达水平无显著性差异(F=3.000,P=0.125)。用RT-PCR法检测SKOV3细胞转染IL-24、转染空载体与未转染细胞中caspase-3 mRNA表达的变化,实验组和对照组均在260bp左右处扩增出caspase-3mRNA特异性条带,在550bp左右处扩增出β-actin mRNA特异性条带,SKOV3未转染组、空载体转染组和IL-24转染组caspase-3 mRNA相对表达量分别为0.26±0.005、0.20±0.004和0.64±0.003。实验组及对照组上皮性卵巢癌SKOV3细胞中caspase-3mRNA相对表达水平有显著性差异(F=1741.000,P=0.000)。 结论: 1.利用电穿孔转染可以将IL-24基因高效导入上皮性卵巢癌SKOV3细胞株; 2.选择培养后的IL-24转染组SKOV3细胞,能稳定表达IL-24mRNA和蛋白,即建立了IL-24稳定表达的上皮性卵巢癌细胞模型; 3.IL-24基因转染后对上皮性卵巢癌SKOV3细胞株的体外增殖有抑制作用; 4.IL-24基因能导致上皮性卵巢癌SKOV3细胞株G2/M期阻滞。 5.IL-24基因表达增高对上皮性卵巢癌SKOV3细胞株凋亡有促进作用。 6.IL-24促凋亡的作用与p53无关,与caspase-3有关。 目的:本部分拟观察将pcDNA3.1-myc-his(-)B-IL-24真核表达质粒,稳定转染至上皮性卵巢癌SKOV3细胞表达后,是否能提高肿瘤细胞对放疗的敏感性。

方法:稳定转染IL-24并筛选出阳性克隆之后,采用进口西门子直线加速器,单次照射上皮性卵巢癌SKOV3细胞。MTT比色法观察细胞增殖抑制情况,流式细胞仪检测细胞凋亡率。 结果: 1、MTT比色法测SKOV3细胞各组的吸光度值。经析因设计的方差分析,经放射治疗后,IL-24基因的导入可使人上皮性卵巢癌细胞系SKOV3的生长受到明显抑制(P=0.000)。两两分析表明,转染pcDNA3.1-myc-his(—)B-IL-24真核表达载体的SKOV3细胞,细胞增殖能力与其它两组相比,差异具有统计学意义(P=0.000)。未转染和转染pcDNA3.1-myc-his(—)B空载体的SKOV3细胞相比,差异无明显统计学意义(P=0.184)。 Selleck NLG919 2、未转染、转染空载体及转染IL-24后的SKOV3细胞,经6Gy放射线处理24小时后,流式细胞仪检测细胞凋亡率平均分别为6.90%,8.13%,20.12%。三组SKOV3细胞凋亡率的差异具有统计学意义(F=350.499,P=0.000),各组之间两两比较发现,未转染组、空载体转染组与IL-24转染组SKOV3细胞之间,凋亡率有显著性差异(P=0.000)。而未转染组与空载体转染组之间,凋亡率无显著性差异(P=0.053)。 结论: 1.外源IL-24基因的过表达,可提高上皮性卵巢癌SKOV3细胞株对射线的辐射敏感性。 目的:本部分拟建立上皮性卵巢癌裸鼠移植瘤模型,用pcDNA3.1-myc-his(-)B-IL-24真核表达质粒对上皮性卵巢癌荷瘤裸鼠进行治疗研究,观察IL-24是否能抑制上皮性卵巢癌荷瘤裸鼠癌细胞的生长。 方法:建立人上皮性卵巢癌SKOV3细胞裸鼠移植瘤模型,瘤体直接注射pcDNA3.1-myc-his(-)B-IL-24后,观察肿瘤体积、重量和抑瘤率。 结果: 1、pcDNA3.1-myc-his(—)B-IL-24真核质粒直接瘤体注射治疗上皮性卵巢癌荷瘤Balb/c nu/nu裸鼠后,肿瘤体积增长较慢,与未转染组及空质粒转染组相比,有显著差异(P=0.000)。 2、IL-24治疗后抑瘤率为63.21%。pcDNA3.1-myc-his(—)B-IL-24真核质粒直接瘤体注射治疗上皮性卵巢癌荷瘤Balb/c nu/nu裸鼠后,肿瘤重量增长较慢,与未转染组及空质粒转染组相比有显著差异(P=0.000)。 结论: 1.IL-24可抑制上皮性卵巢癌SKOV3细胞株荷瘤裸鼠的肿瘤细胞生长。 2.