培养24小时、48小时后倒置显微镜观察细胞学形态结构；四甲基偶氮唑蓝法(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)法测定细胞存活率、抑制率。 4.生化法分别测定培养24小时各组细胞培养上清液中超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、一氧化氮(nitrogen oxide,NO)和丙二醛(malondialdehyde,MD A)的含量。 采用逆转录聚合酶链反应(reverse transcription polymerase chainreaction.RT-PCR)方法测定培养24小时各组p38MAPK.TGF-β1mRNA水平表达情况。

5.各组应用免疫细胞化学法(immunocytochemistry).和蛋白质免疫印迹法(Western blot)测定培养24小时各组p38MAPK.TGF-p1蛋白水平表达情况。 结果： 1.各组细胞形态学：24小时,N组的细胞形态正常,结构清晰可辨。H组细胞杂乱无章,扁平程度最明显。M组细胞与N组细胞形态相似,细胞数量均略增多,胞体略肥大。V组与B组细胞形态改变相似,细胞间隙变大,细胞结构不甚清晰,细胞扁平呈凋亡状态。48小时,H组已全部脱离瓶壁悬浮于培养上清中。 2.各组细胞增殖效应：24小时,与N组相比,H组细胞细胞增殖,OD值增加,细胞存活率提高,与H组相比,V组和B组细胞增殖受到抑制,OD值减少,细胞存活率降低(P均<0.01),与H组相比V组SOD活性升高,NO含量升高,MDA.含量下降(P均<0.01),与H组相比,B组SOD活性升高,MDA的含量下降(P均<0.01),NO的含量升高(P
目的自体静脉桥移植是临床上冠状动脉硬化性心脏病(CHD)及血管闭塞性疾病最常用的手术方法。冠状动脉旁路移植(CABG)术后桥血管的再狭窄严重影响了患者桥血管的近远期通畅率。桥血管再狭窄是一个复杂的、多因素参与的血管重塑过程,确切机制尚未完全明确。本实验旨在通过建立大鼠自体颈静脉动脉化模型,模拟CABG术后生理过程,应用高度选择性的p38MAPK抑制剂CBS3830干预,探讨p38MAPK通路在静脉动脉化后静脉桥再狭窄过程中的作用,为进一步预防桥血管的再狭窄提供理论基础。

Dinaciclib Gefitinib小白鼠 方法将80只SPF级SD雄性大鼠(8-10周龄,体重200~220g),随机分为假手术组(sham group, S)、对照组(control group,C )、单剂量组(single doses group,单)、双剂量组(double doses group,双),每组20只。假手术组仅模拟手术过程,不进行血管移植和药物干预;对照组进行颈静脉至颈动脉的移植,且移植前1h给溶剂(Solvent,甲基纤维素)一次,3mg/kg干预;单剂量组进行血管移植,且移植前1h给新型的p38MAPK抑制剂CBS3830一次,3mg/kg;双剂量组进行血管移植,且移植前1h和移植后4d分别给予CBS3830一次,3mg/kg/次。实验共分9个时间点进行检测:T0为术前0h,T1为术后24h,T2为术后48h,T3为术后4d,T4为术后1w,T5为术后2w,T6为术后4w,T7术后8w,T8术后3m。前6点(T0,T1,T2,T3,T4,T5)分别取血清,ELISA法进行TNF-α、IL-6、IL-1β的检测;而术后1w、2w、4w静脉桥血管取材进行HE染色,通过计算机图像分析系统测定内膜、中膜及外膜的厚度变化情况;免疫组织化学(IHC)测定增殖细胞核抗原(PCNA)的表达;术后1w时,通过RT-PCR技术测定静脉桥p38、β-actin的变化;蛋白印迹技术(western

selleck化学药品 blotting)测定p38、P-p38、β-actin的表达。 结果各组无手术死亡。TNF-α在0～24h呈上升趋势,单剂量组和双剂量组在48h～2w内呈明显下降趋势,单剂量组、双剂量组分别与假手术组(sham)、对照组(con)比较均具有显著性差异(P=.003),而单剂量组与双剂量组比较无显著性差异;单、双剂量组IL-1β水平在24h最高,48h~4d呈逐步下降趋势,4d~2w水平再次升高,在4d最低,与对照组、假手组比较有显著统计学差异(p<0.01);对照组IL-6的水平似呈双峰变化,在24h和4d～1w均有两次升高。而单、双剂量组在0～24h先经历下降趋势,而后上升再下降。仅在24h双剂量组与对照组对比有统计学差异,而在其他时间点各组比较均无差异。HE示各时间点(1w,2w,4w)单、双剂量组内膜、中膜增生明显低于对照组,差异具有统计学意义(p<0.05或p<0.01);单、双剂量组内膜、中膜增生厚度明显高于假手术组,有显著性差异(p0.05)。对照组血管PCNA表达1w时明显升高,2w时达高峰,4w开始下降。单剂量组、双剂量组各时间点明显低于对照组(p<0.

05或P<0.01)，HF组小鼠肝脏组织P-JNK、P-P38MAPK、P-ERK的表达水平均明显高于NC组（P<0.05或P<0.01），然而IKBα蛋白表达低于NC组(P<0.05)；其次，与HF组小鼠相比，HJ组小鼠肝脏组织JAZF1mRNA及蛋白表达均增高（P<0.01），而TNF-α、MCP-1及IL-8的表达显著降低（P<0.05或P<0.01），且P-JNK及P-P38MAPK的表达水平明显降低(P<0.05)，IKBα蛋白表达明显升高（P0.05)。

结论： JAZF1基因表达上调能够抑制高脂喂养小鼠肝脏组织炎症因子TNF-α、MCP-1及IL-8的表达，其调控机制可能与JNK、P38MAPK及NF-κB信号通路的激活抑制密切相关。
目的：观察雷奈酸锶对钴铬钼颗粒（Co-Cr-Mo）诱导小鼠颅骨骨溶解的影响，探讨其在骨代谢中的作用，为防治人工关节松动提供理论依据。 方法：取8周龄雄性ICR小鼠52只，体重25±2g。随机取13只作为空白对照组（A组），假手术后仅给予生理盐水。余下39只构建颅骨骨溶解模型，随机分成三组并给予不同处理：颗粒对照组（B组）给予Co-Cr-Mo颗粒+生理盐水；低剂量治疗组（C组）给予Co-Cr-Mo颗粒+生理盐水+低剂量雷奈酸锶；高剂量治疗组（D组）给予Co-Cr-Mo颗粒+生理盐水+高剂量雷奈酸锶。于术后28天取小鼠颅盖骨行HE染色、ELISA及qRT-PCR检测。 点击此处 结果：各组小鼠均存活至实验完成。HE染色见：B组较A组骨溶解严重，C组和D组骨溶解较B组减轻，尤以D组减轻最为明显。蛋白检测发现：B组TNF-α和RANKL含量均较A组明显增加（P<0.05）；C组TNF-α和RANKL含量高于A组（P<0.05），但低于B组（P<0.05），D组与A组含量差异无统计学意义（P＞0.05），且D组较C组比值偏低（P
目的探讨阻断迷走神经对犬急性坏死性胰腺炎(ANP)血清细胞因子及胰腺病理学的影响。 方法健康杂种雄性犬26只，随机分为假手术组(SG)、ANP对照组(CG)、迷走神经切断+ANP组(VG)。用5%牛黄胆酸钠和胰酶混合液进行逆行胰管注射法建立ANP模型；分别测定3组不同时段血清中淀粉酶(AMY)、超敏C反应蛋白(High sensitivity C-reactive Protein, HCRP)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白介素1β(IL-1β)和白介素10(IL-10)的含量变化；7天后将所有实验犬统一处死，取胰腺组织进行病理观察，并进行病理学评分；实验中途死亡犬进行统计，做死亡原因分析，放弃中途死亡犬各细胞因子检测结果及各生化指标结果的统计。 结果手术前AMY、HCRP、TNF-α、IL-1β、IL-10的血清含量在各组之间均无明显差异(P均>0.05)；手术后CG较SG以上各项血清含量指标都明显升高，具有统计学意义(P均﹤0.05)，而VG的HCRP、TNF-α血清含量又较CG都明显升高，具有统计学意义(P均=0.001),VG的IL-1β血清含量较CG升高，有统计学意义(P=0.022)，VG的IL-10血清含量又较CG降低，有统计学意义(P=0.023)，VG的AMY血清含量与CG相比无明显差异，无统计学意义(P=0.158)；胰腺组织病理学在SG为正常胰腺组织，VG胰腺病理评分与CG相比明显升高，有统计学意义(P=0.03)；SG实验中途无死亡，CG死亡2只，VG死亡4只。

结论1.迷走神经切断后对犬急性坏死性胰腺炎血清中AMY的活性无明显影响，而血清中HCRP的血清浓度明显升高；2.迷走神经切断后使犬急性坏死性胰腺炎血清中促炎因子TNF-α、IL-1β的浓度明显升高，而血清中抗炎因子IL-10的浓度明显降低；3.迷走神经切断后使犬急性坏死性胰腺炎胰腺病理病变加重；4.迷走神经切断后急性坏死性胰腺炎犬的病情明显恶化，说明迷走神经对犬急性坏死性胰腺炎起着非常重要的调控作用。
【目的】研究阿托伐他汀（ATO）对在无血清和缺氧条件下对比剂（CM）诱导人肾小管上皮细胞凋亡的影响，以及氧化应激在该过程中的可能作用机制。 Selleckchem GSK1120212 通常 【方法】以人肾小管上皮细胞（HKC）为研究对象，进行培养，在无血清、缺氧条件下,分别与不同浓度（100、120、150、200mgI/mL）碘海醇孵育12h；碘海醇（120mgI/mL）分别处理细胞2、6、9、12h；不同浓度ATO（10-11、10-10、10-9、10-8、10-7、10-6、10-5mol/L）先与细胞孵育24h，同一浓度ATO（10-7mol/L）先处理细胞6、12、24、36、48h，二者分别再与碘海醇（120mgI/mL）在无血清、缺氧条件下共刺激12h；不同浓度ATO（10-10、10-9、10-8、10-7mol/L）与细胞共孵育24h后，再与碘海醇（120mgI/mL）在无血清、缺氧条件下共刺激12h。采用CCK-8法检测细胞增殖能力；

TUNEL法观察细胞凋亡情况；采用化学法检测丙二醛（MDA）含量和超氧化物歧化酶（SOD）活性； Western blot检测gp91phox、P22phox、bax及bcl-2等蛋白表达。 【结果】 CCK-8法示与正常组(6.06±0.18)%相比，各组细胞增殖能力均受不同程度抑制，其中CM+缺氧组受影响最明显[（57.86±0.28）%, P
目的:采用Meta分析的方法客观评价肾移植术后应用环孢素A（Cyclosporine A，CsA）与他克莫司（Tacrolimus，Tac）在抑制免疫排斥反应发生、移植肾功能、人/肾存活率、血糖变化、心血管疾病相关危险因素（高血压、高血脂）、肝毒性及血红蛋白等方面有效性及安全性的差异。方法:采用电子和手工两种检索方式对相关文献初检。电子检索数据库有Medline database(1994.1-2014.1)、中国期刊全文数据库（CNKI：1994.1-2014.1）、中国生物医学文献数据库（CBM：1994.1-2014.1）、中国循证医学/Cochrane中心数据库（CEBM/CCD）、Cochrane Library。手工检索近期《中华肾脏病杂志》、《中华器官移植杂志》等5种杂志。纳入关于肾移植术后应用CsA与Tac评价有效性及安全性的随机对照试验，所纳入文献数据由两名研究员独立提取并进行文献质量评价，如果出现分歧，则双方讨论或者与第三人协商决定。纳入研究的方法学质量采用Jadad量表评分，应用Cochrane协作网提供的RevMan5.2软件进行统计数据分析。结果:文献初检，中文文献499篇，英文文献343篇，最终纳入28篇RCT(英文22篇,中文6篇)有关肾移植术后应用CsA与Tac治疗的有效性和安全性的对照统计。 ●术后6个月及12个月随访，应用CsA组急性排斥反应发生率均高于Tac组，差异有统计学意义。 ●术后6个月及12个月随访，应用CsA组人存活率均高于Tac组，但P＞0.05，差异无统计学意义。 ●术后6个月随访，CsA组肾存活率低于Tac组，但P＞0.

05),而F组及G组又显著高于H组,F组高于G组之间有显著性差异(P<0.05)。F组高于G组且有显著性差异(P<0.05),其凋亡率却相反,G组又显著高于F组(P<0.05),而F组P-JNK、Bax、caspase-3蛋白及凋亡率显著增高,与E、G及H组比有显著性差异(P
目的意义:严重烧伤后造成肠粘膜血流量下降,肠粘膜组织损伤及通透性增加,使肠道屏障功能障碍,造成肠道细菌移位,引发多器官功能障碍,是导致伤后高代谢的重要原因。因此促进严重烧伤后肠道修复,能减轻脏器炎症反应,防止肠源性感染,改善代谢障碍,加快创面愈合,是临床救治重要措施之一。肠道作为人体最大的内分泌器官,其自身分泌许多肠道激素对肠道结构功能起着重要的保护作用,随着近年来对胰高血糖素样多肽-2(Glucagons

点击此处 like peptide 2,GLP-2)认识的不断深入,发现其对肠道有特异性保护作用。且有广泛临床应用前景。 本研究利用基因重组技术设计构建了GLP-2原核表达载体并诱导表达,初步观察其对烧伤后大鼠肠道及肠上皮细胞的保护作用,利用体外细胞模型,探讨GLP-2促细胞增殖的作用机制及调控因素,为今后临床应用提供理论依据。 材料与方法: 1.利用pET31b(+)表达载体,对GLP-2序列进行重组设计,构建表达质粒进行原核表达,优化条件后表达并进行亲和层析纯化、脱盐。溴化氰裂解后行western blot(WB)鉴定,并低温干燥保存。 2.采用30%TBSAⅢ度烧伤大鼠模型作为体内实验模型,随机分为正常对照组(N);烧伤对照组(C);重组GLP-2治疗组(Gr)及化学合成GLP-2治疗组(G)。检测大鼠伤后第7天肠粘膜通透性,肠粘膜湿重与肠段及躯壳重比,肠粘膜蛋白及肠道病理形态学的变化。RT-PCR及WB检测GLP-2R的表达,利用脂质体基因转染构建稳定表达GLP-2R的Caco-2/GLP-2R(+)细胞作为体外研究模型,随机分为正常对照组(N);缺氧对照组(C);缺氧后重组GLP-2处理组(Gr)及缺氧后化学合成GLP-2处理组(G)。观察不同GLP-2对缺氧后细胞增殖、乳酸脱氢酶及蔗糖酶活性的影响,并检测细胞CDK4及ZO1蛋白表达的变化。

而且 3.构建caveolin-1/pEGFPN2质粒及体外合成caveolin-1 siRNA后瞬时转染Caco-2/GLP-2R(+)细胞,将细胞分为正常对照组(AN)、缺氧对照组(AC)、缺氧后GLP-2处理组(AG)、caveolin-1上调细胞缺氧后GLP-2处理组(CG)、caveolin-1下调细胞缺氧后GLP-2处理组(EG),检测细胞cAMP浓度,GRK2(ser280)磷酸化蛋白变化及细胞增殖,同时应用信号通路抑制剂观察GLP-2信号转导,WB检测ERK信号转导通路中相关蛋白及Akt(ser473)蛋白磷酸化表达的变化,免疫共沉淀检测caveolin-1与GLP-2R的作用,。观察GLP—2对缺氧后细胞增殖信号转导途径的影响以及caveolin-1对GLP-2R跨膜信号的调控 结果: 1.成功设计构建GLP-2/pET31b(+)质粒质粒,测序正确;在BLR(DE3)感受态大肠杆菌种诱导表达最佳条件为1mMIPTG诱导表达4h,通过亲和层析纯化及溴化氰裂解法获得单体GLP-2约100mg,重组得率5mg/100ml。

2.给予重组GLP-2及合成GLP-2后,烧伤后第7天,与烧伤对照组相比,大鼠的肠粘膜通透性明显降低,肠粘膜蛋白含量、肠粘膜与肠段重及与躯壳重之比均明显升高(P＜0.05),而两种GLP-2之间差异无显著性意义(P＞0.05)。形态学观察两种GLP-2均能减轻烧伤后肠粘膜病理损伤。体外实验结果显示,细胞严重缺氧8h立即加入1000nM的GLP-2,24、72h后能够明显增加Caco-2/GLP-2R(+)细胞的细胞增殖(P＜0.05),重组GLP-2与合成GLP-2效果无明显差别(P＞0.05)。而GLP-2处理72小时后,细胞乳酸脱氢酶及蔗糖酶活性无明显变化(P＞0.05)。CDK4及ZO1蛋白表达较缺氧对照组增强。 selleck化学药品液面控制 缺氧后立即给予1000nM的GLP-2处理,24h后,缺氧对照组cAMP含量明显降低(P＜0.01),而GLP-2处理组的cAMP却维持在一个较高水平。CG组细胞的cAMP明显增加,而EG组cAMP含量下调。GLP-2处理24h后,能够明显增加缺氧细胞的增殖(P＜0.05),在CG组细胞增殖更加明显(P＜0.05),EG组增殖作用下降。GLP-2处理后30min,磷酸化GRK2蛋白表达较缺氧对照组增强,无论上调或下调caveolin-1后,磷酸化GRK-2表达下降。给予不同信号通路抑制剂后发现,MEK1/2特异性抑制剂U0126及PI3特异抑制剂LY294002能够明显抑制GLP-2的促增殖作用(P＜0.

86),这说明了MD模拟的必要性。而且,结果清楚地显示出疏水残基Val39、Val47、Ile60、Phel07、Asnl12、Metl57和Ile168在黄酮化合物与CK2结合中起主要作用,并且确定了影响生物活性的重要结构因素。基于受体-配体相互作用机制的能量和结构分析,我们设计出了一系列的新型分子并且通过综合性模拟研究验证了它们具有较高的抑制活性。我们希望此项研究工作能够成为促进新型有效靶向CK2抑制剂研发的一个范例。蛋白激酶CK2和PIM1都属于丝氨酸/苏氨酸激酶,并且具有相似的ATP结合位点,这说明大量的分子能够同时抑制这两种激酶。但是最近研究发现,两个结构相似的分子对CK2和PIM1具有不同的抑制活性,因而推测它们对这两种靶点可能具有不同的选择性机理。在论文的第四章,我们采用系统综合的计算模拟方法对两个小分子与两个蛋白质构成的四个复合体系进行详细的研究。我们采用IFD对接方法得到了复合物的起始结构,接着进行MD模拟研究,自由能计算和分解。分子水平上的比较分析使我们对选择性机理有了较透彻的了解。计算结果显示CK2中残基Val65、Phel12和Val115比PIM1中的对应残基Ala33、Leu88和Pro91与小分子1形成更强的van

der Waals作用力,使得小分子1对CK2具有较高的选择性。CK2中残基Val65、Phel12和Val115的疏水性强于PIM1中对应残基Ala33、Leu88和Pro91恰好证实了上述现象。同样,能量和结构分析也揭示了PIM1中残基Lys35、Glu57和Asp154比CK2中对应残基Lys67、Glu80和Asp174与小分子2形成了更强的氢键作用力,这说明了小分子2对PIM1具有较好的选择性。这主要归因于小分子2中三唑酮与PIM1能够形成强于CK2的氢键作用力。这项计算研究工作提供的数据信息为配体的选择性机理提供了价值性依据。
目的:本实验主要研究隐丹参酮对丝/苏氨酸蛋白激酶活性的影响及其在抑制肝癌细胞株中生长的作用。方法:Western印迹检测隐丹参酮在Hep 没有 G2细胞对丝/苏氨酸蛋白激酶磷酸化的影响以及联合哺乳动物雷帕霉素靶蛋白的抑制剂PP242后检测其凋亡标志物c-Parp的表达、以及丝/苏氨酸蛋白激酶的激活途径。CCK-8法检测隐丹参酮与丝/苏氨酸蛋白激酶抑制剂MK2206或哺乳动物雷帕霉素靶蛋白的抑制剂PP242联合用药对Hep G2的生长抑制作用。结果:1.隐丹参酮增强Hep G2细胞中丝/苏氨酸蛋白激酶的磷酸化。2.抑制丝/苏氨酸蛋白激酶的反馈激活增强隐丹参酮对Hep G2细胞的生长抑制作用,结果发现MK2206明显增强了隐丹参酮对Hep G2细胞的生长抑制作用。3.隐丹参酮对丝/苏氨酸蛋白激酶磷酸化的增强作用依赖于哺乳动物雷帕霉素靶蛋白复合物2活性,结果发现PP242能够抑制隐丹参酮对丝/苏氨酸蛋白激酶磷酸化的增强作用,证明隐丹参酮对丝/苏氨酸蛋白激酶磷酸化的增强作用依赖于哺乳动物雷帕霉素靶蛋白复合物2活性。4.抑制哺乳动物雷帕霉素靶蛋白复合物2活性增强隐丹参酮对Hep

DNA-PK抑制剂 G2细胞的生长抑制作用,结果发现联合使用PP242明显增强了隐丹参酮对Hep G2细胞的生长抑制作用。5.抑制哺乳动物雷帕霉素靶蛋白复合物2活性增强隐丹参酮对Hep 更多 G2细胞的凋亡诱导效应,由于丝/苏氨酸蛋白激酶信号通路在肿瘤细胞存活中发挥重要作用,说明抑制哺乳动物雷帕霉素靶蛋白复合物2活性能够增强隐丹参酮对Hep G2细胞的凋亡诱导效应。结论:我们的研究证明在Hep G2细胞中,AKT丝/苏氨酸蛋白激酶依赖哺乳动物雷帕霉素靶蛋白复合物2能够激活p-AKT473位点的磷酸化,通过抑制丝/苏氨酸蛋白激酶及哺乳动物雷帕霉素靶蛋白复合物2都能够提高隐丹参酮在Hep G2细胞中的生长抑制作用,为隐丹参酮肿瘤治疗的临床联合用药提供了理论基础。
一、研究背景:缺血再灌注室性心律失常是心梗采用溶栓或冠状动脉介入治疗术后血管再通所致的常见临床现象,其发生率较高,也是引起心血管临床事件的主要原因之一,因此怎样减少缺血再灌注所诱发的室性心律失常已成为目前临床心血管病介入治疗以及防治缺血性心脏病的研究热点。整合素连接激酶(integrin-linked kinase,I L K)是在多类组织、细胞中普遍表达的介导胞外信号分子调节胞内结构与功能的关键蛋白激酶,参与了细胞增殖、分化、迁移以及血管再生等多种细胞生物学功能的调节。大量研究表明ILK在心脏结构、功能的调节以及心脏疾病(如心室肥厚、心肌病、心梗等)的发生发展中具有重要的调节作用。然而,ILK是否在缺血再灌注室性心律失常的发生中发挥调节作用及可能的调控机制如何,目前未见相关的报道。既往有大量研究证实缝隙连接蛋白43(connexin

43,C x 4 3)在心律失常的发生中具有重要作用,上调Cx43的表达、促进其磷酸化以及抑制其重塑均可减少再灌注心律失常的产生。然而,下调心肌ILK表达可引起Cx43的表达的下降,提示ILK可能参与调节Cx43信号分子介导的相关功能。近年有报道,Akt可通过磷酸化Cx43-373位点,稳定Cx43在闰盘处的分布,抑制Cx43重塑,然而ILK作为Akt的上游信号分子,可直接或间接磷酸化Akt-473位点,调节Akt的活性。因此,我们推测I L K可通过Akt调控Cx43靶点间接预防再灌注室性心律失常的发生。为此我们采用缺血再灌注心律失常模型研究ILK在大鼠缺血再灌注室性心律失常中的作用以及可能的调控机制,重点研究Cx43在ILK调节再灌注室性心律失常中的作用。二、研究方案及重要方法1.ILK在心脏缺血再灌注室性心律失常中的作用为研究ILK在缺血再灌注心律失常中的作用,我们采用Langendorff系统构建离体心脏缺血再灌注心律失常模型,给予ILK激动剂LPTP、抑制剂Cpd22预处理心脏,分为Sham组、I/R组、I/R+Cpd22组、I/R+LPTP组、I/R+Cpd22+LPTP组,记录并观察比较各组心律失常发生情况。2.明确C x 43在ILK改善心脏再灌注室性心律失常中的作用为研究Cx43在ILK改善心脏再灌注室性心律失常中的作用,我们将上述5组心脏组织分别提取组织蛋白,采用蛋白印迹法检测C x 43蛋白表达水平的改变,同时通过免疫荧光法检测Cx43的分布。3.

3.BIRB796′恢复KBV200裸鼠移植瘤模型对紫杉醇的敏感性,但并不增加紫杉醇在裸鼠体内的毒性。4、BIRB796不影响ABCB1的蛋白和mRNA水平的影响。5.BIRB796双向调节ABCB1ATPase活性,来实现抑制ABCB1外排功能。6、p38信号通路对BIRB796逆转ABCB1介导的MDR无协同作用。7、Docking分析模拟出BIRB796与ABCB1位点1之间可能存在的分子间相互作用,疏水作用最有可能是二者之间结合的主要原因。
牙周病是炎性骨吸收性疾病，其主要特征是牙龈炎症、牙槽骨吸收和牙龈萎缩，进而导致牙齿松动和脱落，直接影响患者口腔牙周组织健康和牙齿使用寿命。在牙周病的组织损伤中主要参与这一过程的是牙周病原体及其代谢产物，尤其是脂多糖（lipopolysaccharide，LPS），它能诱导宿主发生免疫反应，激发免疫细胞和局部邻近组织细胞增加炎性因子的分泌表达，改变局部微环境。以往研究表明，雌激素在骨吸收与骨改建的过程中扮演了十分重要的角色，慢性牙周疾病在发生和发展进程中就有雌激素参与其中，例如绝经后的妇女骨质疏松及口腔牙周病发展十分迅速，与机体缺乏雌激素的因素有关。目前，雌激素影响牙周组织健康的机制尚不清楚。骨髓间充质干细胞(Bone

marrow mesenchymal stem ce11s,BMSCs)是一种具有多向分化潜能的干细胞，在体外特定培养条件下能够向多种细胞组织等结构分化，常作为组织工程研究的首选种子细胞。本实验旨在模拟牙周病局部炎症微环境中，若将骨髓间充质干细胞移植至牙周缺损部位，雌激素是否对炎症微环境具有抑制作用及其作用机理，以及雌激素能否调控骨髓间充质干细胞骨向分化能力，为临床上应用雌激素治疗牙周病提供新的理论和思路。

AC220供应商 或者 本实验内容如下： 1.大鼠BMSCs的分离、培养和鉴定 选用雌性SD大鼠，鼠龄6-9个月。用全骨髓贴壁筛选培养法分离培养原代大鼠骨髓间充质干细胞，对BMSCs进行成骨诱导培养和成脂诱导培养，应用流式细胞仪对BMSCs表面抗原CD44、CD45、CD29和CD11b进行测定。 结果显示BMSCs经定向成骨诱导后，茜素红染色为阳性，定向成脂肪诱导后，油红-0染色为阳性，表面抗原CD29和CD44阳性，CD45和CD11b为阴性，鉴定其为大鼠骨髓间充质干细胞。 2.雌激素对LPS诱导的大鼠BMSCs炎性因子表达的影响 加入LPS脂多糖、17β-雌二醇和特异性雌激素受体抑制剂ICI182,780。分为对照组，E-782组，LPS组，LPS+E-92组，LPS+E-2组，LPS+E-72组和LPS+E-72+ICI182,780组，刺激6h、12h、24h、48h和72h后，提取细胞培养上清液和细胞裂解物，进行TNF-α、IL-1β和IL-6的ELISA检测及Real-time PCR检测。 结果显示，在细胞培养上清液、细胞裂解物中和细胞mRNA水平，LPS刺激后BMSCs中TNF-α、IL-1β和IL-6的表达量明显增高，E2可以明显抑制其表达，并呈剂量依赖性，ICI182780可以抑制E2的作用。经LPS和E2刺激后，三种炎性因子在12h和24h表达水平达到峰值，随时间延长逐渐减弱。 GDC-0941订单 3.雌激素对LPS诱导的大鼠BMSCs炎性因子表达的调控机制

加入MAPK信号通路的三种通路抑制剂，即ERK通路抑制剂PD98059，JNK通路抑制剂SP600125，p38α通路抑制剂SB203580。再加入LPS、雌激素，培养12h后，收集细胞培养上清液，进行TNF-α、IL-1β和IL-6的ELISA检测。 结果显示三种炎性因子的表达量较之单纯加入LPS后出现不同程度的降低。尤以JNK通路抑制剂SP600125作用最为明显。 4.雌激素对LPS诱导的大鼠BMSCs骨向分化能力的影响 分为对照组，E-72组，LPS组，LPS+E-7-72组和LPS+E2+ICI182,780组，加样刺激6h、12h、24h、48h和72h后，提取细胞培养上清液和细胞裂解物进行OPG和RANKL的ELISA检测，以及进行OPG和RANKL的mRNA检测。 结果显示，在细胞培养上清液、细胞裂解物中和细胞mRNA水平，加入E2后，OPG表达量明显增高；加入LPS后，RANKL的表达量明显增高；加入LPS和E2后，OPG表达量明显增高，而RANKL的表达量明显下降。经LPS和E2刺激后，OPG在12h和24h达到并维持最高峰值，RANKL在24h表达水平达到最高峰。OPG/RANKL比值在E2组最高，LPS组最低，同时加入LPS和E2后的比值较之单纯加入LPS组明显升高。 5.雌激素影响LPS诱导的大鼠BMSCs表达OPG/RANKL的炎性因子调控途径 加入LPS、E2，并分别加入TNF中和性抗体anti-TNF-α，antiIL-1β，以及IL-6可溶性受体sIL-6R。分别培养6h、12h、24h、48h和72h后，收集细胞培养上清液进行OPG和RANKL的ELISA检测。 结果显示，加入antiTNF-α、antiIL-1β和sIL-6R后，OPG表达与单纯加入E2无明显差别，与加入LPS和E2比较略有下降，至24h达高峰，随后逐渐下降；RANKL的表达与单纯加入LPS相比，以及与加入LPS和E2相比，均有不同程度的下降，其中以加入sIL-6R后最为明显，至24h表达水平达到最高峰。 结论： 1.

干预HSC的研究主要有:干扰细胞信号转导通路,抑制炎症反应,对抗氧化应激,调节相关细胞因子活性等.本文综述了P38 MAPK信号通路的主要功能、常见研究方法及对肝纤维的作用机制,以期为实验研究提供思路.
目的:二烯丙基二硫(DADS)为天然植物大蒜中的提取物,能抑制多种肿瘤细胞生长,本文探讨丝裂原激活的蛋白激酶(MAPKs)、3-磷酸肌醇激酶(PI3K/Akt)信号通路和Bcl-2家族成员在DADS诱导的人白血病HL-60细胞凋亡中的作用。方法:利用流式细胞术检测DADS诱导的白血病细胞凋亡,Western blot研究MAPKs和PI3K/Akt信号通路在DADS诱导的人白血病HL-60细胞凋亡中的变化及对Bcl-2家族凋亡相关蛋白表达的影响。结果:DADS呈浓度和时间依赖性地诱导人白血病HL-60细胞凋亡,在此过程中ERK/MAPK和PI3K/Akt信号通路被抑制,而p38MAPK信号通路被激活,ERK/MAPK和PI3K/Akt信号通路通过降低Mcl-1(myeloid

cell leukemia-1)和升高Bax的表达诱导人白血病细胞凋亡,而p38MAPK则不是通过调控Mcl-1和Bax的表达诱导人白血病细胞凋亡,进一步利用RNA干扰技术沉默Mcl-1基因可增加DADS对HL-60细胞增殖抑制和诱导凋亡作用。结论:MAPK和PI3K/Akt信号通路通过下调Mcl-1的表达参与了DADS诱导的HL-60细胞凋亡作用。
目的探讨不规则趋化因子(FKN)在动脉粥样硬化形成中的作用及其可能的信号转导途径,以及FKN影响人单个核细胞表达NFκB过程与Ras/p38丝裂原活化蛋白激酶信号传导通路的相关性。方法采用密度梯度离心法分离人外周血单个核细胞,将细胞预处理后分为:空白1组、FKN 1组、FKN+Ras抑制剂组(FTI-277组)、空白2组、FKN 2组、FKN|p38抑制剂组(SB203580组)。分别于30 哪里 min时,采用Western blot方法对磷酸化p38及NF-κB进行半定量测定。结果与空白1组、空白2组比较,FKN 1组、FKN 2组NF-κB和p38相对吸光度值明显增加(P
mTOR是处于调节细胞代谢、生长、增殖等整个过程中心环节的重要激酶。干扰或抑制mTOR会引起细胞尤其是癌细胞的生长停滞继而死亡,因而也被公认为是癌症治疗当中的一个潜在靶标。一系列的mTOR抑制剂Rapamycin及类似物已经形成并在临床抗肿瘤中有所应用,但其展示的效应非常有限。随着研究的深入,发现mTOR信号通路存在反馈激活机制:即抑制mTOR能反馈性激活多个与细胞生长增殖相关的信号通路。并且认为是这些反馈激活机制削弱了mTOR抑制剂的效能,也是其临床效应未达预期的原因。本文就目前国内外研究较深入的mTOR-AKT,mTOR-ERK,mTOR-eIF4E反馈信号通路做详细概述,并阐述目前采取的防止这一反馈机制形成的Rapamycin类似物与特定通路抑制剂的联合用药策略,使mTOR抑制剂在临床抗肿瘤中能充分发挥其效能。
p38丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号途径是成肌细胞分化过程中重要的调节途径。p38

M APK蛋白在成肌细胞分化过程中受上游丝裂原活化蛋白激酶激酶3(M KK3)、丝裂原活化蛋白激酶激酶6(MKK6)的激活而活化其下游成肌分化蛋白(MyoD)、肌生成素5(Myf5)、肌形成蛋白(myogenin)、肌肉调节因子4(MRF4)等肌肉调节因子。p38 MAPK信号途径的活化可以进一步增加骨骼肌纤维细胞蛋白含量,增加肌纤维长度和横截面直径,使骨骼肌纤维在数量不变的前提下质量大幅度提高,本文就p38 ABT-263研究购买 MK-1775体内 MAPK信号途径调节骨骼肌生长发育的机理进行综述。
AIM:To

examine how high-mobility group box 1 (HMGB1) regulates hepatocyte apoptosis and,furthermore,to determine whether glycyrrhizin (GL),a known HMGB1 inhibitor,prevents HMGB1-induced hepatocyte apoptosis.METHODS:A human hepatocellular carcinoma cell line stably transfected with a bile acid transporter (HuhBAT cells),were used in this study.Apoptosis was quantified using 4′,6-diamidino-2-phenylindole dihydrochloride staining and the APO Percentage apoptosis assay,and its signaling cascades were explored by immunoblot analysis.Kinase signaling was evaluated by immunoblotting and by using selective inhibitors.It is also tried to identify hepatocyte apoptosis affected by the HMGB1 inhibitor,GL.RESULTS:HMGB1 increased cellular apoptosis in HuhBAT cells.HMGB1 led to increased cytochrome c release from mitochondria into the cytosol,and induced the cleavage of procaspase 3.However,it did not affect the activation of caspase 8.HMGB1-induced caspase 3 activation was significantly attenuated by the p38 inhibitor SB203580.GL significantly attenuated HMGB1-induced hepatocyte apoptosis.GL also prevented HMGB1-induced cytochrome c release and p38 activation in Huh-BAT cells.

基于手部传热分析的血流动态变化评价。 首先从断层医学图像序列出发,提出了三维有限元网格模型的重构方法,构建了具有真实外形的手部三维有限元网格模型。然后,基于Darcy定律和Pennes生物传热理论构建了血流传热模型,用于考察反应性充血过程中指尖温度响应的定量特性。结果表明,指尖温度在无过载充血的情况下需要超过200秒才能恢复到稳定水平,而在强过载充血的情况下,仅需50秒。同时,强弱反应性充血中温度峰值相差0.3℃,足以通过民用红外热像仪分辨出来。因此,结合温度反弹量,恢复时间以及其他诸如稳定温度等基准量,就能有效地衡量血管壁调节能力,从而对心血管疾病做出风险预测。

2.脉冲高强度聚焦超声照射下药物输运特性的定量分析。 通过核磁共振成像技术记录了不同脉冲高强度聚焦超声(p-HIFU)照射前后新西兰大白兔大腿肌肉组织内药物浓度的动态变化。基于这些实验数据和Toft&Kermode模型,发展了优化算法得到了肌肉组织内的药物渗透率,药物清除率以及细胞外空隙分数。通过对这些组织药物输运参数的统计分析,定量地考察了不同p-HIFU能量沉积对药物传输特性的影响和作用机理。结果显示,p-HIFU引起的肌肉组织内的初期水肿与后期药物输运能力的增强存在着紧密的联系。更重要的是,p-HIFU在引起组织内药物渗透性增强的同时还能有效地扩大细胞外空隙和降低药物的清除率,这种综合作用能够为药物与组织提供充分的接触作用,使得组织累计接触的药物量可以增加到3-4倍。通过合理地控制p-HIFU照射,最终能够达到在减少组织烧伤的情况下最大化组织内药物输运增强的效果。 3.免疫系统细胞间相互作用网络的数学建模。 根据SOD1基因突变引起的肌萎缩性脊髓侧索硬化症(ALS)中免疫系统的作用,建立了ALS中免疫细胞与运动神经元相互作用的系统模型。该模型采用常微分方程来描述各个细胞通过调节因子相互作用所引起的动态变化。进一步,基于SOD1转基因小鼠的载体实验数据,采用优化算法确定了数学模型中的待定参数。优化后的数学模型能够恰当地再现疾病发展过程中的初始期、稳定期和恶化期。然后,通过对几种潜在治疗方案的测试发现,抑制1型辅助性T细胞能够有效地减缓疾病的发展,从而改善患者的生活质量。这揭示了1型辅助性T细胞的快速增长在疾病后期快速恶化过程中的主导作用。

selleck激酶抑制剂 4.细胞内蛋白质信号通路模型的数学建模。 提出了系统考察致活酶抑制剂综合效果(对癌细胞的抑制作用和肝细胞的副作用)的算法。基于该算法,我们根据在线共享的实验数据建立了PC9癌细胞和人类原代肝细胞内的蛋白质信号通路模型,描述了作为细胞内信号传递载体的各蛋白质磷酸化水平对外部干扰的动态响应。然后通过该模型对27种致活酶抑制剂综合治疗效果的测试,筛选出克里唑蒂尼作为抑制PC9癌细胞而且避免损伤肝细胞的最佳药物。进一步,基于该算法开发了在线的致活酶抑制剂综合治疗效果预测工具KIEP,以便于研究人员使用该工具预测药效。
目的：FA/BRCA途径被激活的标志事件是FANCD2的单泛素化。研究已经显示FA/BRCA途径的DNA损伤修复功能在肿瘤细胞对DNA交联剂类药物(如顺铂,DDP)的耐药中发挥了作用,但是该途径参与肺癌细胞对DDP耐药的确切机制尚未阐明,抑制FA/BRCA途径功能是否能增加肺癌细胞对DDP的敏感性未见报道。为此本研究目的如下： Selleck Tyrosine Kinase 抑制剂 Library (1)通过对DDP处理后的肺癌细胞A549和SK-MES-1的细胞增殖率变化及FANCC、FANCF、FANCL mRNA和蛋白表达水平变化,研究FANCC、FANCF、 FANCL蛋白参与肺癌细胞对DDP耐药的可能性及程度,探寻肺癌细胞FA/BRCA途径与DDP耐药相关的主要或关键蛋白。 (2)应用siRNA转染技术沉默肺癌细胞A549和A549/DDP(耐DDP细胞株)FA/BRCA途径中的FANCF基因,探讨FANCF基因抑制后逆转肺癌细胞对DDP耐药的效应及可行性,以及FANCF基因沉默和FANCD2(L/S)单泛素化程度的关系,确定FANCF在FA/BRCA途径DNA损伤修复功能中的关键作用,探讨FA/BRCA途径参与肺癌细胞对DDP耐药的作用机制,确定FANCF是否有望成为降低或逆转肺癌细胞对DDP耐药的新型靶基因。

为什么 方法： (1)体外培养肺癌细胞株A549和SK-MES-1,采用CCK-8法分别测定经不同浓度DDP处理这二个肺癌细胞株后24h和48h的细胞增殖率。 (2)采用实时荧光定量RT-PCR技术(QRT-PCR)和Western blotting检测肺癌细胞株中的FANCC、FANCF、FANCL mRNA和相应蛋白表达。 (3)合成针对FANCF和FANCD2基因的siRNA,用阳离子脂质体转染法分别转染于肺癌细胞株A549A和549/DDP,获得FANCF和FANCD2基因沉默的六组A549和A549/DDP细胞(包括FANCF基因和FANCD2基因分别沉默,及FANCF和FANCD2基因共沉默)。 (4)采用CCK-8法分别测定经不同浓度DDP处理上述六组肺癌细胞株(A549和A549/DDP)后24h和48h的细胞增殖率。 (5)采用Western blotting法检测经不同浓度DDP处理上述六组肺癌细胞株(A549和A549/DDP)后24h和48h的FANCF、FANCD2蛋白表达水平及FANCD2单泛素化水平(以FANCD2-L/FANCD2-S比值表示,L/S)。 (6)采用流式细胞仪测定不同浓度DDP处理肺癌细胞A549/DDP(包括FANCF基因和FANCD2基因分别沉默,及FANCF和FANCD2基因共沉默共3组)的细胞凋亡率。 (7)采用免疫荧光法测定FANCF和FANCD2基因沉默前后经DDP处理的肺癌细胞株FANCD2核聚小体表达的变化。结果： (1)肺癌细胞A549和SK-MES-1的细胞增殖率均随DDP浓度增加和作用时间延长而逐渐降低,呈剂量依赖性(P<0.05)和时间依赖性(P<0.05)。随DDP作用时间的延长,各个DDP浓度组细胞增殖率逐渐下降,呈时间依赖性(P<0.05)和时间依赖性(P<0.

Methods:Immunohistochemical

staining with SP method was conducted to determine the expressions of GSK-3beta,Beta-catenin and PPAR-gamma in 48 cases of medulloblastoma and 10 normal cerebellar tissues. Results:The rate of abnormal expressions of beta-catenin and PPAR-gamma in MB was higher than that in normal. Conversely,GSK-3beta in MB was lower than that in the normal 寻找更多 (P

目的研究糖原合酶激酶3β(glycogen synthase kinase-3β,GSK-3β)抑制剂抗前列腺癌细胞裸鼠移植瘤生长的效用。方法建立前列腺癌PC-3和LNCaP/Bcl-xL细胞株裸鼠移植瘤模型,观测GSK-3β抑制剂氯化锂(LiCl)及SB216763腹腔内给药后移植瘤重量及体积的变化。同时通过BrdU掺入的免疫组化染色探讨移植瘤的增殖状态,TUNEL染色比较对移植瘤细胞凋亡的影响。结果LiCl及SB216763均可明显抑制移植瘤生长(P<0.05)。与对照组相比,LiCl给药组细胞BrdU标记明显降低(P<0.05),TUNEL染色差异无统计学意义。结论抑制GSK-3β活性可抑制前列腺癌裸鼠移植瘤细胞在体内的生长,其中LiCl可能通过干扰癌细胞DNA复制发挥作用。
BACKGROUND: Previous studies have demonstrated that mutant amyloid precursor protein

(APP)or presenilin-1 (PS1) genes increase susceptibility to ischemic brain damage induced by middlecerebral artery occlusion. Possible mechanisms include over-production of beta-amyloid peptide(Aβ).OBJECTIVE: Because Aβ is over-produced PD-0332991细胞系 in the APP/PS1 double-transgenic mouse, the presentstudy focused on mechanisms of increased ischemic damage due to mutant APP and PS1 genes bymeasuring oxidative stress, mitochondrial function, and calcium homeostasis.DESIGN, TIME AND SETTING: The non-randomized, controlled, in vivo and in vitro

无 experimentswere performed at the Medical Research Center, Second Clinical College, Jinan University betweenMay and October 2008.MATERIALS: Male APP transgenic mice carrying the mutant 695swe gene and female PS1transgenic mice carrying the mutant Leu235Pro gene were donated from the University of HongKong. SHSY5Y human neuroblastoma cells were purchased from ATCC (Manassas, VA, USA), andAβ_(1-42) was obtained from Sigma-Aldrich (St. Louis, MO, USA).METHODS: APP transgenic mice were mated with PS1 transgenic mice to produce APP/PS1double-transgenic mice and wildtype littermates mice. The photothrombotic stroke model wasinduced in six APP/PS1 double-transgenic and 6 wildtype littermates mice.

5%DSS组(n=6)、和DSS模型supCD28 MAb给药组(n=8)。空白对照组给予蒸馏水自由饮用,3.5%DSS组和给药组均予3.5%的DSS溶液自由饮用5天,给药组在饮用3.5%DSS第一天给予腹腔注射supCD28 MAb 1mg/只。每日进行疾病活动标准(DAI)评分。第8天处死所有小鼠,取结肠标本测量长度,做HE染色,行结肠病理学评分。模型组和给药组取脾脏,肠系膜淋巴结,淋巴细胞进行抗CD4, 寻找更多 CD62L,CD103,CD152染色,于流式细胞仪上进行分析比较两组Treg细胞的变化情况。结肠,脾脏细胞提取RNA后,逆转录为cDNA,对Foxp3, IFN-γ,TNF-α,IL-6, IL-10,TGF-β细胞因子进行实时定量PCR分析,比较各因子的变化情况。 结果： 第一部分： 1.注射supCD28

MAb后第3天,小鼠脾脏、肠系膜淋巴结较对照组有显著增大,而胸腺与对照组相比体积变化不大。小鼠脾脏及肠系膜淋巴结的Foxp3+CD4+Treg细胞增加约3倍,外周血Foxp3+CD4+Treg细胞增加约2倍。胸腺中Foxp3+CD4+Treg细胞在两组中没有显著差异。 2.肠系膜淋巴结中Foxp3+CD4+Treg细胞在注射后第3天达到顶峰,随后逐渐下降,至第30天左右可恢复到接近对照组水平。脾脏及外周血中Foxp3+CD4+Treg细胞在注射后第7天达到顶峰,随后逐渐下降,至第30天左右可恢复到接近对照组水平。胸腺细胞中Foxp3+CD4+Treg细胞一直无显著增加或减少。 3.脾脏及肠系膜淋巴结中CD4+CD103+Foxp3+ Treg细胞,CD4+CD152+Foxp3+ Treg细胞,CD4+CD62L+Foxp3+ Treg细胞在注射后第三天较对照组均显著增加,倍数约5-10倍。 Buparlisib半抑制浓度 4.实时定量PCR的结果显示：脾脏淋巴细胞中Foxp3的表达较对照组显著增加,注射后第3天达到高峰,约为18.5倍。脾脏淋巴细胞中Th1及Th2途径的细胞因子也有增加,其中以Th2途径中IL-10的增加最为显著,第3天达到151倍。 第二部分： 1.DSS模型supCD28 MAb给药组小鼠一般情况优于DSS模型组小鼠。全结肠长度8.00±0.44cm长于DSS模型组6.63±0.30cm (p<0.05)。病理组织学评分8.50±5.07也显著低于DSS模型组29.00±3.83(p
研究了两种MAPKs抑制剂处理对牡丹切花瓶插品质的影响。结果表明:与对照相比,MAPKs抑制剂PD098059和SB202190预处理都增大了牡丹切花的最大花径,延长了最佳观赏期和瓶插寿命,改善了牡丹切花瓶插期间的水分状况;PD0980959预处理降低了呼吸峰,抑制了内源乙烯的释放,SB202190预处理延迟了呼吸峰的到来时间,降低了呼吸峰,促进了切花内源乙烯的释放。结果提示两种MAPK抑制剂的作用机制之间存在一定的差异。
背景:抵抗素是由脂肪组织分泌的脂肪细胞因子之一。它可能通过与其他器官的交互作用或者影响脂肪组织本身的功能而在肥胖和胰岛素抵抗方面发挥作用。但是目前就脂联素是否可以影响脂肪组织分解和脂联素分泌尚未阐明。方法:我们从肠外科手术患者中选取14例成年男性分离获得其肠系膜脂肪组织。将肠系膜脂肪组织进行培养并给与不同的干预:即抵抗素(100ng/ml)、抵抗素+H89(1μM)、抵抗素+P培养基D98059(25μM)、抵抗素+SB201290(20μM),并收集干预后12、24hr培养基。用ELASA法测定脂联素水平,用蛋白印迹方法测定干预处理的蛋白表达。结果:抵抗素诱导甘油(3.62±0.57

vs5…
目的观察p38蛋白激酶对难治性癫痫大鼠行为学、海马细胞外液抗癫痫药物浓度及其脑内多药转运体P-糖蛋白和MRP1表达的影响。方法健康雄性SD大鼠,随机分成三组,分别为正常对照组(n=8)、癫痫组(n=8)和拮抗剂组(n=8)。采用戊四氮腹腔注射建立癫痫模型,大鼠点燃后的惊厥行为按照Racine的标准进行观察评分,采用Western blot和免疫荧光法比较各组大鼠脑内p38 MAPK、PGP、
Background:Src-Suppressed-C MG-132分子重量 Kinase Substrate(SSe CKS)has been suggested as involved in regulating oligodendrocyte apoptosis induced by activated astrocytes in EAE,a model for

some aspects of multiple sclerosis(MS).Recently,SSe CKS was detected in heat shock protein A12B(HSPA12B)interacting proteins …
1.甲状旁腺素缺乏经细胞外钙介导卵巢血管生成障碍而致生殖能力降低郭健苗登顺南京医科大学人体解剖学系江苏210029为探讨甲状旁腺素(PTH)缺乏引起生殖功能降低的机制,使用组织学、免疫组织化学和Western blot的方法比较分析了同窝4个月PTH基因敲除纯合子小鼠和野生型小鼠分别给予正常钙(1%)、低钙(0.01%)及高钙饮食(2%)后生殖能力、卵巢成熟卵泡数量、黄体形成及血管生成的差异。结果发现,与同窝野生型雌性小鼠(PTH~(+/+)相比,正常饮食
To investigate the effects of mechanical factors on matrix metalloproteinase -9(MMP-9) expressions in rat bone marrow-derived mesenchymal stem cells(MSCs) and possible mechanism signal.Rat bone marrow MSCs were isolated and cultured,then,exposed to laminar shear stress at indicated strengths,such…

05),HbAlC在4周时有所下降,8周时进一步下降且有统计学差异(p<0.05),IPGTT示SGK1抑制剂组30min、60min、120min血糖下降有统计学差异(p<0.05),葡萄糖曲线下面积(AUC)明显减少(p
目的:探讨青海非小细胞肺癌(Non-small

cell lung cancer,NSCLC)患者表皮生长因子受体(Epidermal growth factor receptor,EGFR)基因突变率,突变状态与其临床基本资料及病理类型之间的相互关系;对比观察NSCLC患者不同EGFR基因状态下接受化学治疗和分子靶向治疗后的临床疗效及无疾病进展期(progression free surviva,PFS),为NSCLC患者的临床治疗提供有力的理论依据。方法:搜集2013年01月至2015年10月本地区医院经组织病理学证明的晚期或局部晚期的不能手术的NSCLC患者,通过病灶穿刺及淋巴结穿刺、支气管镜活检等获得组织标本,应用扩增阻滞突变系统(amplification 而且 refractory mutation system,ARMS)法检测EGFR基因。记录患者各种基本资料(性别、民族、年龄、吸烟情况)、明确病理类型、体力状况(performance status,PS)评分及分期,分析EGFR基因状态与上述各因素的关系,根据患者不同EGFR基因状态行分子靶向治疗或化疗,对规律治疗者进行疗效评价,分析临床有效率及PFS。结果:1、70例非小细胞肺癌患者EGFR突变阳性27人,突变率38.6%;其中,男、女突变率分别为27.3%、57.7%(P=0.012);吸烟、不吸烟患者突变率分别为18.5%、51.2%(P=0.006);腺癌、鳞癌突变率分别为39.7%、0.00%(P=0.519);小于60岁患者与大于等于60岁患者突变率分别为36.8%、40.6%(P=0.746);汉族、非汉族突变率分别为37.3%、66.7%(P=0.555);Ⅲ期、Ⅳ期突变率分别为33.3%、45.2%(P=0.313);PS评分0-1分与2分突变率分别为37.9%、50.0%(P=0.637);外显子19突变15例(55.56%,15/27),外显子21突变11例(40.74%,16/27),外显子18、20同时突变1例(3.70%,1/27),外显子19、21同时突变1例(3.70%,1/27),外显子19、20同时突变1例(3.70%,1/27)。2、NSCLC患者EGFR基因突变与性别、吸烟情况相关,差异具有统计学意义(P0.05)。3、EGFR突变阳性患者靶向治疗与化疗的客观有效率ORR分别为37.5%、9.1%,差异无统计学意义,P>0.05;疾病控制率DCR分别为87.5%、27.3%,差异有统计学意义,P0.05;DCR分别为27.3%、65.1%,差异有统计学意义,P<0.05)。EGFR突变阴性患者化疗的中位PFS是201d。结论:1、青海NSCLC患者EGFR基因突变率为38.6%,其与性别、吸烟史相关,其中女性、非吸烟患者EGFR基因突变率高。2、EGFR基因突变以外显子19、21为主。3、EGFR突变阳性靶向治疗疾病控制率高于化疗;EGFR突变阴性化疗比阳性化疗疾病控制率高。4、NSCLC患者治疗前须行EGFR基因检测,敏感突变型患者TKI治疗较化疗可获得更好的PFS,突变阳性者应首选靶向治疗,EGFR基因野生型患者行化疗为最佳。
目的:探讨5-氟尿嘧啶(5-FU)、曲古霉素A(TSA)对Lovo细胞株生物学行为的影响和TSA对Lovo细胞株5-FU化疗敏感性的影响及可能的机制。方法:选取结直肠癌Lovo细胞株,将实验分为5组:对照组、5-FU组、TSA组、TSA预处理组、联合组(TSA+5-FU)。(1)MTT法及软琼脂集落形成实验:对各组细胞加药后的增殖水平进行检测。(2)Transwell肿瘤细胞侵袭实验及划痕愈合实验:对干预24

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selleck怎么样 h后各组细胞的侵袭和迁移能力进行检测。(3)流式细胞术:对干预24 h后各组细胞的凋亡率水平及细胞周期各时相比例进行检测。(4)Western-blot法:对干预24 h后各细胞组胸苷酸合酶(TS)蛋白的表达情况进行检测。结果:(1)MTT细胞增殖检测:与对照组相比,5-FU组、TSA预处理组及联合组细胞24 h、48 h和72 h生长受到抑制(p0.05)。(2)软琼脂集落形成实验:与对照组相比,各用药组集落形成数均明显下降(p<0.05),与5-FU组相比,TSA预处理组与联合组细胞集落形成数减少显著(p0.05)。(3)细胞侵袭及迁移能力检测:与对照组相比,各用药组的穿膜数及划痕愈合率都有所下降(p<0.05),TSA预处理组及联合组与5-FU组比较,细胞穿膜数和划痕愈合率下降明显(p0.05)。(4)细胞凋亡检测:与对照组比较,各加药组细胞凋亡比例增加明显(p<0.05),与5-FU组比较,TSA预处理组及联合组细胞凋亡比例升高显著(p0.05)。(5)细胞周期检测:与对照组相比,各用药组在细胞周期各时相的比例变化无显著差异(p>0.05)。(6)TS蛋白表达检测:与对照组相比,5-FU组TS表达无明显差异(p>0.05),TSA组、TSA预处理组及联合组细胞TS表达明显下调(p<0.05);与5-FU组相比,TSA组、TSA预处理组及联合组细胞TS表达显著减少(p0.