Western Blot法检测三黄煎剂联合表柔比星对MDA-MB-231细胞凋亡相关蛋白及Aurora A表达的影响。结果:三黄煎剂对MDA-MB-231细胞增殖抑制率呈浓度梯度依赖增长(P0.05)。三黄煎剂能够调节MDAMB-231细胞Aurora A、p53的mRNA及蛋白的表达。siRNA沉默AIWR 1urora A后,将三黄煎剂对MDA-MB-231细胞增殖抑制率下调了34.6%(51.5%到33.7%)。三黄煎剂与表柔比星联用能够增加表柔比星对MDA-MB-231细胞的增殖抑制率及凋亡率,调节凋亡相关蛋白c-PARP,c-Caspase 3,Bcl-2,Bax及AurorAZD4547a A的表达水平。结论:三黄煎剂能够增加MDA-MB-231细胞对化疗药物表柔比星的敏感性,可能与三黄煎剂对Aurora激酶A的抑制有关。
目的:观察芝麻素对自发性高血压大鼠(spontaneously hypertensive rats,SHR)肾脏损伤的作用及与PI3K/查找更多AKT/m TOR信号通路之间的关系。方法:雄性SHR随机分成模型组、芝麻素低剂量(80 mg/kg)、高剂量(160 mg/kg)组及卡托普利(30 mg/kg)组。同时选取同周龄WKY大鼠作为正常对照组。每日灌胃1次,模型组、正常对照组给予0.5%羧甲基纤维素钠(CMC-Na),给药组给予CMC-Na溶解的上述剂量药物,给药前及给药后每隔2周测量1次血压。

(2)以极光激酶A为靶标进行药物设计。首先,通过研究极光激酶A与其已知抑制剂之间的相互作用规律,找到抑制剂的共同骨架结构特点。在此基础上设计了一系列新的化合物,利用里宾斯基五规则对它们进行了筛选,并对它们与极光激酶A进行了分子对接研究,计算了结合自由能AG,最后得到一些新的化合物。计算结果表明标明它们能与极光激酶A很好的结合,有可能成为先导化合selleck kinase抑制剂物。最后利用SYLVIA软件对它们的合成难度进行了评价。 本论文的第二部分,建立了关于180个含苯基的羧酸类化合物酸碱解离常数(pKa)的两个定量构效关系预测模型。这些化合物分子量在122.12到288.34的范围内,包含H,C,N,O,S,F,Cl,Br及I等元素。使用Cerius~2程序计算了236个分子描述符来表GSK1349572核磁征这些化合物,并使用统计学方法从中选择了12个描述符。分别使用多元线性回归分析(MLR)及支持向量机回归(SVM)结合10重交互检验方法来预测pKa数值。多元线性回归模型对pKa的预测结果相关系数为0.90,标准偏差为0.32;支持向量机模型结果较好,相关系数为0.91,标准偏差为0.31。 总之,本论文比较研究了极光Selleck激酶A和B的结构相似性与差异性。进行了以极光激酶A为靶标的药物分子设计研究工作,得到了一些具有潜在生物活性的化合物。建立了含苯基的羧酸类化合物pKa的多元线性回归与支持向量机的预测模型。
第一部分:伊马替尼类似物的合成与活性研究 甲磺酸伊马替尼作为第一个分子靶向治疗的抗肿瘤药物,在治疗慢性粒细胞性白血病上取得了巨大成功。但是随着临床应用范围的扩大和时间的推移,其治疗费用昂贵及耐药现象也逐渐显现。

本实验研究表明ABCBl和ABCG2明显的限制了威罗菲尼对黑色素瘤脑转移瘤的治疗效果,联合应用其抑制剂依克利达可以增强其疗效,但仍不足以完全逆转该限制作用。
研究背景与目的：三阴性乳腺癌(triple-negative breast cancer, TNBC)是指雌激素受体(estrogen receptor,selleck化学 ER)、孕激素受体(progesterone receptor, PR)及人类表皮生长因子受体2((human epidermal growth factor receptor-2, HER-2)表达均为阴性的一类乳腺癌,约占所有乳腺癌的15%左右。与其他类型乳腺癌相比,三阴性乳腺癌不CHIR-99021临床试验能从内分泌治疗和抗HER-2治疗中获益,有着更高的死亡率、复发风险以及转移发生率。因此,寻找新的治疗策略,对提高三阴性乳腺癌患者预后至关重要。在三阴性乳腺癌中,雄激素受体(androgen receptor, AR)阳性的表达率为10%-15%,目前已有临床研究证明抗雄治疗在三阴性乳腺癌Epacadostat细胞系中的肯定效果。乳腺癌易感基因1 (breast cancer susceptibility gene 1, BRCA1)在三阴性乳腺癌中的突变率为10.6%-19.8%,在散发型三阴性乳腺癌中聚腺苷二磷酸核糖聚合酶1(poly (ADP-ribose) polymerase 1, PARP1)抑制剂的治疗效果不明显,但在BRCA1突变的三阴性乳腺癌中取得了阳性结果。

体外肿瘤细胞增殖抑制活性测试表明,该系列化合物的抗肿瘤活性与R-roscovitine相当,部分略优于R-roscovitine。CDK2激酶抑制活性测定结果表明,大多数化合物对cDK2激酶的抑制活性较弱。 考虑到化合物结构的新颖性和多样性,我们尝试设计并合成一类7-氮杂吲哚醌为母核的化合物,共计17个。但体外肿瘤细胞增殖抑制活性测定结果表明AC220 NMR,该类化合物抗肿瘤活性很弱,故对新型cDK2抑制剂的设计仍需要进一步的探索。
警务接入平台位于公安专网内,主要为获得授权的企业和单位提供实时、准确的数据和信息支持。该平台需要和各类企业和单位进行合作,需要进行频繁的数据交换和信息检索,这些信息大多机密级别较高或涉及公共安全等问题,若在数据传输的过程中处理不当其后果十哪里分严重。已有工作大多只能简单的记录数据交换的用户信息,无法验证用户信息的真伪,对于陌生用户及存在安全隐患用户的防范意识较差。如果能够设计一个系统可以实现对申请数据交换用户的身份信息进行核实,对身份不明或不正确的人员(存在安全隐患)进行及时预警,则可有效的保证警务平台在提供数据交换服务过程中的安全性。因此,如何设计一种什么新型的警务接入系统,可以保障向合法用户提供稳定的数据支持的同时实现对非法用户的防范和预警将更具现实意义。 基于以上分析,本文设计并实现了基于虚拟专用网络的警务安全接入系统。该系统主要基于虚拟专用网络技术实现了原有物理的专用网的功能,却不需要庞大的物理消耗,具有较高的安全性和实用性。具体工作如下：(1)实现了身份认证功能：考虑到警务平台对安全性要求较高,故本文采用PKI体系方法实现对用户的身份认证。

这些糖苷水解酶主要采用了两种催化机理。一是经典的构象保持型反应机理,另一种是底物参与催化的构象保持型反应机理。这两种机理均需要一个氨基酸作为广义酸碱参与反应过程。基于多活性中心比对信息,这些糖苷水解酶的活性中心可以被归至六大类。而其中与广义酸碱相互作用的氢键可能对催化起了重要作用。从头计算的结果表明,这些保守残基与广义酸碱的作用可以降低17时间-20kcal/mol的反应能垒,说明这些保守的相互作用是化学上非常重要的,而这种降低能垒的现象主要是由于质子从广义酸转移到离去基团发生在亲核攻击过渡态之前。此外,在两类底物参与反应的活性中心中,底物亲核基团与一个趋同进化而来的酪氨酸形成保守的相互作用。这个相互作用对反应能垒似乎没有起到降低作用,但是它在另一方面降不要低了反应熵,对催化同样起到了不可或缺的作用。 另一类是人类蛋白激酶(human protein kinase),我们通过对比所有结构可用的人类蛋白激酶的活性中心,找出在保守的口袋中高度分化的氨基酸位点,并结合了激酶与抑制剂的结合信息,计算了激酶高度分化的位点与抑制剂结合情况的互信息,找出了不同激酶选择性结合不同抑制FDA-approved Drug Library分子量剂的相关氨基酸位点,最后通过机器学习的方法,对抑制剂与激酶结合情况进行了反预测,验证了这些位点的重要性。 此外,我们还将结构生物信息学的方法扩展到药物重利用的领域。一款新药,从研发到上市,是一个非常耗时耗力的过程。而一些已经批准上市的药物,陆续被发现对非靶标疾病也有一定疗效。已经批准上市的药物,是已经通过各种体外体内实验及临床检验被证明是安全的药物,如果能对这些药物开发出新的用途,将大大省时省力。

肿瘤细胞水平的实验证实VX-680可诱导多种肿瘤细胞凋亡,能抑制包括乳腺癌、淋巴瘤、前列腺癌、胰腺癌、黑色素瘤、颈部肿瘤等众多肿瘤细胞增殖。所以Aurora激酶抑制剂将有可能成为肿瘤治疗的有力武器。 Aurora激酶抑制剂在治疗肿瘤中具有广阔前景,我们通过体外实验研究VX-680对人膀胱癌T24细胞的抑瘤作用,并从诱导细胞凋亡、调控细胞分裂和增殖等方面对其作用机理进行较深入的研很少究,为BTCC的治疗提供新的思路。 第一章人膀胱移行细胞癌中Aurora A, CyclinD1, CyclinB1和Bcl-2的表达及其相关性的研究 目的：探讨Aurora A, CyclinD1, CyclinB1和Bcl-2在BTCC中的表达及其意义 方法：用免疫组化的方法检测Aurora A, CyclinD1, CyclinB1和Bcl-2在所以56例BTCC和15例正常膀胱组织中的表达情况,并分析其与BTCC临床病理因素的关系。 结果：膀胱癌组织Aurora A阳性率为51.8%(29／56),高于正常膀胱组织的13.3%(2/15), (P<0.05)。流式细胞术检测其凋亡率,72h时VX-680浓度为0nM：(0.493±0.033)%,100nM：(6.608±0.550)%,300n还有M：(12.225±1.232)%,500nM：(18.275±4.986)%,各浓度组间两两相比差异性显著(P0.05)。 结论： 1.VX-680引起的Aurora A、CyclinD1、CyclinB1和Bcl-2的表达下调可以从多个通路抑制细胞增殖和诱导凋亡,并呈剂量效应关系和时间效应关系。 2. Aurora A与CyclinD1、CyclinB1和Bcl-2基因及蛋白的表达下调呈现明显相关性,他们之间可能存在相互调控。

随着纳米技术的发展,纳米材料与生物医学相结合的潜在发展成为热点。而在这其中稀土上转换发光纳米材料(upconversion nanoparticles,UCNPs)格外引人关注。1999年,有研究小组首次开展了UCNPs在分子探针领域的研究,并报道UCNPs在DNA芯片荧光检测中作为标记物的作用,并且其检测灵敏度是荧光染料Cy5的3倍。随后,研究Selleckchem ATM激酶抑制剂人员开展了一系列利用稀土上转换发光探针进行生物荧光检测的研究。与常用的生物荧光标记材料相比,UCNPs具有一系列优点,例如光、化学性质稳定,大的斯托克斯位移,相对窄的吸收和发射频带,使用寿命长,生物毒性低等。另外传统的紫外线激发源有非特异性荧光影响大,穿透深度小,长时照射对生物细胞损伤大等缺点,而近红外光作为UCNPs激点击此处发光源,有穿透深度大,非特异性荧光影响小,对生物组织几乎无损伤等与紫外线激发源差异明显的优点。此外,从激发光源角度讲稀土上转换发光只需要低功率密度的近红外连续激光器(980nm),相对于高功率密度的脉冲双光子激光激发产生的上转换发光,经济普适性更佳。UCNPs以上陈述的优点成为研究的焦点,主要集中在标志物成像,免疫分析和还有光动力疗法(photodynamic therapy,PDT)等领域。但是传统的UCNPs存在水溶性不佳、粒子直径过大、细胞内聚集过少、荧光过弱等缺点,本研究旨在合成一种水溶性UCNPs并对它的细胞成像、细胞毒性加以探讨。水热法合成以聚乙烯吡咯烷酮(polyvinylpyrrolidone,PVP)作为表面配体的Na YF4∶20%Yb3+,3%Er3+的UCNPs,并完成对它物理性质、光学性质的鉴定。

结论:白藜芦醇具有对抗MG132诱导细胞毒性的潜在作用。
多发性骨髓瘤(multiple myeloma,MM)是一种血液系统恶性肿瘤,我国医科院血液病研究所对既往十余年一项回顾分析显示:累计432例MM患者中,发病年龄在20~87岁之间,中位发病年龄为57岁,55~65岁年龄段发病患者最多见,40岁以下患者占10.8%,高于西方文献报告(2%),男女之比为Selleck Capmatinib2.35:1,与欧美等国家报告相似,且患者疾病分型多为IgG型(50%~60%),其次为IgA
组蛋白的乙酰化和去乙酰化修饰是表观遗传学研究中重要的研究领域,主要是通过组蛋白乙酰基转移酶(histone acetyltraqsferase, HAT)和组蛋白去乙酰化酶(histone deacetylase, HDAC)共同调控的。还有其中组蛋白去乙酰化反应由HDAC催化,该酶主要包括Zn2+依赖性的和NAD+依赖性的两种类型。其中Zn2+依赖性的HDAC在许多癌症类型中表达异常,并与肿瘤的发生和发展密切相关。HDAC的小分子抑制剂能够导致肿瘤细胞凋亡、分化、生长抑制和血管生成抑制。目前vorinostat(suberoylanilide hydroxamic acselleck怎么样id, SAHA)和romidepsin已被FDA批准上市用于治疗皮肤T细胞淋巴瘤(cutaneous T cell lymphoma, CTCL),并有多种HDAC抑制剂在临床试验阶段对血液瘤显示良好的治疗效果。因此HDAC抑制剂已成为抗肿瘤药物的重要研究领域。 根据HDAC2与SAHA的共晶结合方式,HDAC抑制剂包含Zn2+螯合基团(ZBG)、连接区域(Linker)和酶表面识别区域(Cap)等三个部分。

结果显示,TGFα中和抗体与EGF的混合液并未影响EGF受体和ERK1/2的磷酸化水平,说明TGFα中和抗体与EGF并未发生特异性的交叉反应。 3) TGFα与细胞增殖的时效关系 在EGF刺激细胞后不同时间加入TGFα抗体中和培养液中细胞分泌的TGFα, EGF刺激30小时后使用放射渗入法检测各组细胞的增殖水平。结果显示,在EGF刺激细胞1小时前或第12小时使用TG可能Fα中和抗体,肝细胞增殖将会完全受到抑制,而在第24小时使用TGFα中和抗体,则细胞增殖受到部分抑制。说明细胞分泌的TGFα主要在EGF刺激细胞12小时后起作用,与P53促进细胞增殖具有相同的时效关系,提示P53通过TGFα促进细胞增殖。 3.3TGFα促进细胞增殖的机制 1) TGFα促进Cyclin D表达 TGFα促进细胞增殖的作用主不要发生在EGF刺激细胞12小时后,因此在EGF刺激细胞12小时后加入培养液TGFα中和抗体,在24小时和30小时收获细胞。结果显示,TGFα中和抗体抑制Cyclin D的表达,说明细胞分泌的TGFα起到促进Cyclin D表达的作用。证实了P53抑制Cyclin D的表达是通过TGFα实现的。 2) TGFα促进Cyclin D细胞核内分布selleck激酶抑制剂 Cyclin D的功能也依赖其在细胞内的分布,当EGF刺激细胞30小时后,Cyclin D和CDK4均位于细胞核内,而如果不给予细胞EGF刺激,则Cyclin D和CDK4均位于细胞质内。当使用鼠源性的TGFα单克隆抗体中和培养液中细胞分泌的TGFα后,Cyclin D口CDK4与不给予EGF刺激细胞的情况相似,仍位于细胞质中未进入细胞核内,说明细胞分泌的TGFα起到促进Cyclin D和CDK4细胞核内聚集的作用。

间变性淋巴瘤激酶(anaplastic lymphoma kinase, ALK)是胰岛素受体酪氨酸激酶家族成员之一。ALK在肿瘤中的异常改变主要是基因移位,异常的移位导致许多ALK融合蛋白(ALK fusion protein)产生,并持续激活ALK,导致肿瘤细胞的异常增殖和生长。同时抑制c-Met和ALK已经证明在胶质母细胞瘤等肿瘤细胞中有协同效应。因此,研CAL-101溶解度究同时作用于c-Met和ALK的双重激酶抑制剂(c-Met/ALK dual inhibitor)是非常有前景的抗肿瘤药物。美国FDA于2011年批准了c-Met/ALK双重抑制剂克唑替尼(Crizotinib)用于治疗有EML4-ALK融合蛋白形成的非小细胞肺癌患者。 虽然c-Met和ALK的双重激酶抑制剂是非常有前景的抗肿瘤策略,但点击此处在文献中报道的此类抑制剂很少,除Crizotinib外,还有一个是Xcovery公司研发的X-396,目前在进行一期临床试验。我们实验室多年来一直开展c-Met抑制剂的研究,本论文是在实验室前期的工作基础上,综合文献报道的结果以及临床上应用c-Met/ALK双重抑制剂克唑替尼(Crizotinib)成功的策略,设计和合成新的作用于c-MABT-737et和ALK的化合物,旨在发现新的高活性和高选择性的c-Met/ALK双重抑制剂。 主要的实验方法和实验结果 一.SMU系列螺环化合物的设计与合成以及分子对接模拟 在我们实验室之前有关c-Met抑制剂的研发中,发现了一类螺环化合物是有效的高选择性c-Met抑制剂,这些化合物分子中的螺环片段能很好地适应c-Met的ATP结合口袋,而c-Met/ALK双重抑制剂克唑替尼分子中含有典型的激酶铰链区结合基团,即2-氨基吡啶。