4、为探讨Ezrin影响U251和U87细胞迁移、浸润性生长的机制,RT-PCR和Western blot分析shRNA-Ezrin-2与过表达载体pEGFP-C1/Ezrin转染细胞的Rac1的表达,结果显示,pEGFP-C1/Ezrin转染组很少Rac1表达量高于shRNA-Ezrin-2转染组和对照组,而shRNA-Ezrin-2转染组低于对照组。表明Ezrin可激活Rac1,Ezrin对U251和U87细胞的影响是通过Rac1实现的。 5、Transwell所以发现U87细胞的迁移能力强于U251细胞,为分析这种差异的原因,对Ezrin结构进行了分析,结果显示,U87细胞的Ezrin蛋白在第66、258、265和577位发生变异,而C端的34氨基酸是Ezrin与F-actin结还有合的位点,N端的296个氨基酸是与C端107个氨基酸残基相联系的功能域[22],在此区域内发生氨基酸变异,是否影响Ezrin与F-actin或细胞膜的结合而影响其功能,从而影响细胞的迁移。本研究对具有不同浸润能力的脑胶质瘤细胞U251和U87的Ezrin蛋白功能和结构通过生物信息学方法加以分析、说明。